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红木深衣

捐助贵宾 (小有名气)

[求助] BIFC转化 已有1人参与

在双分子荧光互补技术中,构建了重组质粒后为什么要转化到大肠杆菌中,再提取质粒,再转染到细胞中,为什么不直接转染到细胞中?
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wx1308897716

木虫 (小有名气)

神虫

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
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红木深衣: 金币+10 2017-04-30 09:50:50
你构建的重组质粒,不转大肠怎么繁殖
2楼2017-04-28 11:15:59
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elabscience

新虫 (小有名气)

不转大肠怎么繁殖
专注科学研究
3楼2017-04-28 13:50:34
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红木深衣

捐助贵宾 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by elabscience at 2017-04-28 13:50:34
不转大肠怎么繁殖

pcr不是可以扩增吗?
4楼2017-04-30 09:51:20
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Esther_Young

铜虫 (小有名气)

大肠杆菌(DH5a)拷贝率比较高 所以我们的重组载体都会先转化大肠杆菌让它大量繁殖后再转到作用菌株(如表达感受态 大肠杆菌酵母等等)农杆菌拷贝率很低 直接转不是不可以 成功率比较低。

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5楼2019-03-31 14:48:35
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Esther_Young

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 红木深衣 at 2017-04-30 09:51:20
pcr不是可以扩增吗?...

这个扩增和PCR扩增不一样的。
简单说我们需要的是一个环状的带有我们目的基因的质粒 PCR只能扩增线装的呀

发自小木虫IOS客户端
6楼2019-03-31 14:49:46
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