| 查看: 3542 | 回复: 4 | |||
[求助]
IPTG诱导BL21表达外源蛋白
|
|
菌株为BL21，用于外源蛋白表达，载体为pET28a。摇瓶37℃培养，在od为0.6时进行不同IPTG浓度诱导，但是全菌电泳结果没有任何差别，大神们知道为什么吗？应该怎样改进呢 发自小木虫Android客户端 |
回复此楼» 猜你喜欢
欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律
已经有82人回复
-
感觉是下周放榜了
已经有8人回复
-
filecode=后面第一个是大写字母
已经有10人回复
-
时间戳变了，能看出什么问题？
已经有4人回复
-
哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜？
已经有15人回复
-
今天系统多次维护，明天很可能放榜！
已经有9人回复
-
时间戳又变了8-15
已经有25人回复
-
2027广东省杰青
已经有6人回复
-
快农历七夕节了，轻松一下，男人悄悄话，女施主请不要进来。
已经有3人回复
-
咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否
已经有26人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- BL21(λDE3）中表达外源蛋白
已经有2人回复
- 求助BL21（DE3）表达外源基因的问题
已经有7人回复
- 蛋白表达问题
已经有14人回复
|
都没有诱导出来？还是表达量差别不大，如果差别不大的话可能IPTG浓度影响不大，一般来说都用0.5mM，如果没诱导出来建议多挑取几个单克隆先用0.5mM IPTG诱导，选择一个能诱导出来的，或者也可以考虑低温过夜诱导 发自小木虫IOS客户端 |
2楼2017-04-27 13:14:44
|
你说的全菌电泳是什么意思，如果是取等量培养完的培养液跑的电泳那应该没有意义，因为由于诱导剂浓度不一样导致最终诱导完的菌的浓度也不一样，你要么稀释成相同的OD600再跑电泳，要么测粗酶酶活。 发自小木虫IOS客户端 |
» 本帖已获得的红花（最新10朵）
氺泽兮木兰3楼2017-04-27 14:02:58
4楼2017-04-27 14:36:10
5楼2017-04-27 14:39:53
