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IPTG诱导BL21表达外源蛋白
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菌株为BL21，用于外源蛋白表达，载体为pET28a。摇瓶37℃培养，在od为0.6时进行不同IPTG浓度诱导，但是全菌电泳结果没有任何差别，大神们知道为什么吗？应该怎样改进呢 发自小木虫Android客户端 |
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都没有诱导出来？还是表达量差别不大，如果差别不大的话可能IPTG浓度影响不大，一般来说都用0.5mM，如果没诱导出来建议多挑取几个单克隆先用0.5mM IPTG诱导，选择一个能诱导出来的，或者也可以考虑低温过夜诱导 发自小木虫IOS客户端 |
2楼2017-04-27 13:14:44
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你说的全菌电泳是什么意思，如果是取等量培养完的培养液跑的电泳那应该没有意义，因为由于诱导剂浓度不一样导致最终诱导完的菌的浓度也不一样，你要么稀释成相同的OD600再跑电泳，要么测粗酶酶活。 发自小木虫IOS客户端 |
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氺泽兮木兰3楼2017-04-27 14:02:58
4楼2017-04-27 14:36:10
5楼2017-04-27 14:39:53