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新虫 (初入文坛)

[求助] PCR求助已有1人参与

实验室自己构建了一个可以切割核糖体失活蛋白的质粒，从之前师兄那拿的构建好的质粒，已经验证可以切开，想突变一下，所以先要将目的基因重新PCR连接到T载体上进行突变，可是发现P不出来，将质粒进行酶切验证发现也切不来，如果说是没有连接成功的话，但是验证可以切割开核糖体失活蛋白，不知道原因在哪里？

1楼 2017-04-26 11:26:23

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金虫 (小有名气)

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感谢参与，应助指数 +1
然然家的(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-04-27 14:31:24

先要把用来扩增目的片段的引物确定好，是否能有效从基因组中扩增出目的片段，如果引物有效，没有道理不能从质粒上扩出目的片段

学海无涯，乐在其中；谨言慎行，惜时自勉！

2楼2017-04-26 16:49:30

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