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然然家的

新虫 (初入文坛)

[求助] PCR求助 已有1人参与

实验室自己构建了一个可以切割核糖体失活蛋白的质粒,从之前师兄那拿的构建好的质粒,已经验证可以切开,想突变一下,所以先要将目的基因重新PCR连接到T载体上进行突变,可是发现P不出来,将质粒进行酶切验证发现也切不来,如果说是没有连接成功的话,但是验证可以切割开核糖体失活蛋白,不知道原因在哪里?
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bestzdz

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
然然家的(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-04-27 14:31:24
先要把用来扩增目的片段的引物确定好,是否能有效从基因组中扩增出目的片段,如果引物有效,没有道理不能从质粒上扩出目的片段
学海无涯,乐在其中;谨言慎行,惜时自勉!
2楼2017-04-26 16:49:30
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