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nicegreat

新虫 (小有名气)

[求助] 求助

各位大神们,请问为何重组质粒菌液pcr可以批出来,但是提质粒双酶切验证却没有目标条带。第一次做原核表达,拜托啦

求助


求助-1


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痞子无敌

金虫 (正式写手)

送去测个序…几十块钱的事…

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当你当你的眼睛眯着笑
5楼2017-04-26 00:56:30
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宁文峰

新虫 (小有名气)


nicegreat(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-04-27 08:52:29
考虑一下酶切试剂,体系和条件吧,还有质粒浓度和纯度

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所追求的不在明天,而在现在以前
6楼2017-04-26 08:02:04
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普通回帖

nicegreat

新虫 (小有名气)

上图为双酶切图,下图为菌液PCR图

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2楼2017-04-25 21:20:29
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nicegreat

新虫 (小有名气)

上图左边六个样为酶切,右边为重组质粒

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3楼2017-04-25 21:21:32
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nicegreat

新虫 (小有名气)

4楼2017-04-25 21:21:45
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nicegreat

新虫 (小有名气)

7楼2017-04-27 07:28:23
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nicegreat

新虫 (小有名气)

测序了,可是结果失败了,不知道怎么办了

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8楼2017-05-03 11:47:57
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Kapok曲奇

新虫 (小有名气)

你做的同源表达还是异源?提取的质粒也可能含有基因组,所以扩增条带的模板不一定是质粒

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9楼2017-05-03 12:12:38
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nicegreat

新虫 (小有名气)

引用回帖:
9楼: Originally posted by Kapok曲奇 at 2017-05-03 12:12:38
你做的同源表达还是异源?提取的质粒也可能含有基因组,所以扩增条带的模板不一定是质粒

异源超达,真核基因的原核表达

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10楼2017-05-03 12:20:34
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