应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 质粒转化
191/2返回列表12下一页
查看: 1529  |  回复: 18
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

18270879372

新虫 (小有名气)

[求助] 质粒转化 已有3人参与

克隆菌株转化没有问题 但是表达菌株在转化时就一直不长菌，也试了其他几家的BL21 但是都没有长 质粒送去测序 结果显示正常 以前师姐也做过 没有问题   这次师姐也没做出来   求助哪位大神能给指条路。。。。 @youlinglyw
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2017-04-25 15:14:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

贱贱JMe

木虫 (小有名气)

教导主任

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
18270879372(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-04-27 14:34:40
质粒没有问题但是长不出来。要么就是感受态的问题，要么就是培养基的问题。不管用哪种转化方法，按照说明书操作就可以。可以从以上两方面找原因。
赞一下(1人) 回复此楼
想做一位科研好人
2楼2017-04-25 15:20:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xinxiyuzhou

至尊木虫 (著名写手)
质粒转DH5a后再提取，重转一下，感受态可以试试全式金公司的，抗性选择对了吗？

发自小木虫Android客户端
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2017-04-25 15:38:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

18270879372

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by xinxiyuzhou at 2017-04-25 15:38:46
质粒转DH5a后再提取，重转一下，感受态可以试试全式金公司的，抗性选择对了吗？

我提了TOP10的质粒 重新转 还是没有长
赞一下 回复此楼
4楼2017-04-25 15:57:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

18270879372

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 贱贱JMe at 2017-04-25 15:20:20
质粒没有问题但是长不出来。要么就是感受态的问题，要么就是培养基的问题。不管用哪种转化方法，按照说明书操作就可以。可以从以上两方面找原因。

谢谢您 但是我还想问下 就是我换了几家公司的菌 都没有长 而top10 和DH5阿发 都长了
赞一下 回复此楼
5楼2017-04-25 16:00:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

18270879372

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by xinxiyuzhou at 2017-04-25 15:38:46
质粒转DH5a后再提取，重转一下，感受态可以试试全式金公司的，抗性选择对了吗？

谢谢您的建议
回复此楼
6楼2017-04-25 16:01:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

18270879372

新虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 18270879372 at 2017-04-25 16:00:32
谢谢您 但是我还想问下 就是我换了几家公司的菌 都没有长 而top10 和DH5阿发 都长了...

还可能是培养基的问题么？ 做表达菌株的转化有木有比较特别要注意的点？
赞一下 回复此楼
7楼2017-04-25 16:10:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

西西sm

新虫 (正式写手)
我质粒酶切都出问题了，跑胶的片段都不对，怎么办

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
8楼2017-04-25 17:50:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

冰之雪域

新虫 (小有名气)
★
18270879372(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-04-27 14:35:27
难道你的目的蛋白是某种酶，转化到bl21中后自己泄露表达，对菌体本身来说会发生制死效果

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
9楼2017-04-25 18:06:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

18270879372

新虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by 冰之雪域 at 2017-04-25 18:06:28
难道你的目的蛋白是某种酶，转化到bl21中后自己泄露表达，对菌体本身来说会发生制死效果

谢谢你的回复，目的蛋白应该没有问题 因为师姐在去年还纯化过该蛋白，也是的相同的菌株，所以该可能性不是很大。
赞一下 回复此楼
10楼2017-04-26 08:48:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 18270879372 的主题更新
191/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +22 Lanmanbaby 2026-08-09 36/1800 2026-08-12 22:50 by sdfapple719
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见，大家看看几个A，几个B? +10 Tide man 2026-08-11 10/500 2026-08-12 20:59 by 陈晨晨陈啊
[基金申请] 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分？ +11 yufeiwaner 2026-08-09 13/650 2026-08-12 08:17 by yufeiwaner
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果？ +3 yuleib84 2026-08-11 3/150 2026-08-11 21:53 by jnhyjjm
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[硕博家园] 读博的好处 +3 lnee 2026-08-11 3/150 2026-08-11 18:10 by 希望我好好的
[基金申请] 什么时候出结果，有咨询渠道？？？ +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +3 布布和一二 2026-08-11 4/200 2026-08-11 15:20 by aasahr
[基金申请] 听说今天filecode变了 +26 布布和一二 2026-08-06 49/2450 2026-08-11 13:18 by WH3796
[基金申请] 我的国基提前知道中了，可是同事的操作让我实在接受不了，怎么会有这样的人 +8 家与远方 2026-08-10 13/650 2026-08-11 09:49 by 家与远方
[基金申请] 基金中了 +15 laoda193707 2026-08-06 15/750 2026-08-11 00:11 by jiafei2190
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
[基金申请] 这样的filecode谁见过 +11 布布和一二 2026-08-08 22/1100 2026-08-10 11:10 by wmfsnow
[基金申请] fileCode有新解读？ +10 Tide man 2026-08-08 18/900 2026-08-09 12:55 by 仁砚薪传
[基金申请] 关于豆爷回答的JTJC与%2F数量 +5 yang182083 2026-08-06 7/350 2026-08-08 18:29 by zhanghaozhu
[基金申请] 国基金的申报应该改成非等额制，评价高的钱多评价低的钱少，但是增加资助率 +7 a089 2026-08-07 7/350 2026-08-08 18:05 by gltch
[基金申请] 化学口download_prp&fileCode的固定段好像这几天一直没变，有变的大神么？ +3 Tide man 2026-08-07 4/200 2026-08-07 22:39 by Tide man
[基金申请] filecode变化情况 +6 布布和一二 2026-08-07 22/1100 2026-08-07 14:45 by 且听虎啸
[基金申请] 大家散了吧，后缀研究没有意义，别浪费时间了，过好目前的每一天，不要焦虑 +5 Tide man 2026-08-06 7/350 2026-08-07 13:11 by 医学老男孩
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭