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Song1002

新虫 (初入文坛)

[求助] 质粒转农杆菌中下游PCR 扩增不出来

我用的是pXEH 质粒,抗性为潮霉素,连接所需片段上下游,质粒PCR 扩增潮霉素和上下游都正常,转入农杆菌后得到的菌落验证上游和潮霉素都能扩增出来条带,唯独下游扩增不出来,验了很多转化子也转了很多次都是这种情况,恳请问一下是为什么?怎样解决?

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2013jpwang

新虫 (初入文坛)

试试在潮霉素和下游基因内部设引物扩增

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2楼2017-04-24 20:53:34
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Song1002

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 2013jpwang at 2017-04-24 20:53:34
试试在潮霉素和下游基因内部设引物扩增

出现这个现象的原因是什么呢?是因为农杆菌对外源基因有修饰作用吗?

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3楼2017-04-24 21:00:57
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樱花祭

新虫 (小有名气)

您好,请问您后来是怎么解决的啊?遇到了同样的问题,只扩增到了上游片段……求指导

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4楼2018-11-26 15:00:32
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