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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 质粒转农杆菌中下游PCR 扩增不出来
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Song1002

新虫 (初入文坛)

[求助] 质粒转农杆菌中下游PCR 扩增不出来

我用的是pXEH 质粒，抗性为潮霉素，连接所需片段上下游，质粒PCR 扩增潮霉素和上下游都正常，转入农杆菌后得到的菌落验证上游和潮霉素都能扩增出来条带，唯独下游扩增不出来，验了很多转化子也转了很多次都是这种情况，恳请问一下是为什么？怎样解决？

@天使托 发自小木虫IOS客户端
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1楼 2017-04-24 20:17:13
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2013jpwang

新虫 (初入文坛)
试试在潮霉素和下游基因内部设引物扩增

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2楼2017-04-24 20:53:34
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Song1002

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 2013jpwang at 2017-04-24 20:53:34
试试在潮霉素和下游基因内部设引物扩增

出现这个现象的原因是什么呢？是因为农杆菌对外源基因有修饰作用吗？

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3楼2017-04-24 21:00:57
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樱花祭

新虫 (小有名气)
您好，请问您后来是怎么解决的啊？遇到了同样的问题，只扩增到了上游片段……求指导

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4楼2018-11-26 15:00:32
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