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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 新药研发 » 临床研究 » LCMS色谱峰后移
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xiao杉儿

金虫 (小有名气)

[求助] LCMS色谱峰后移 已有3人参与

各位大神，我目前在做一个化合物血浆样品的方法验证（用的LCMS），发现它的保留时间每天之间都在变化（基本是后延），我用的是5 mM的醋酸铵+0.1%FA和甲醇作流动相，有柱温箱，流动相都是每天新制的，而且都是我自己配的，所以应该不会有流动相配制误差。另外，与第一天相比，压力有所增加。跪求各位路过的大神，这可能是哪里的问题呢？应该怎么解决呢？万分感谢！！！！
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1楼 2017-04-23 16:03:15
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xiao杉儿

金虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 淡淡幽雅 at 2017-04-23 16:22:47
采用循环冲柱程序：水相从90-70-40-10（中间需设平衡时间段），冲三个循环大概2-3个小时，冲洗完毕后采用标准样品进行测试，看保留时间是否稳定...

好的，谢谢，我去试试！
另外，我换了一根同类型的柱子，出峰时间还是靠后，这是不是说明不是柱子的问题呢？
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6楼2017-04-23 16:26:53
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淡淡幽雅

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
可能是样品中的内源性物质吸附在色谱柱上，好好冲下柱子及管路后再使用
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一入科研深似海，从此假日是路人
2楼2017-04-23 16:07:09
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xiao杉儿

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 淡淡幽雅 at 2017-04-23 16:07:09
可能是样品中的内源性物质吸附在色谱柱上，好好冲下柱子及管路后再使用

首先谢谢您的回复
关于“好好冲下柱子及管路后再使用”，我之前用90%的水和90%的甲醇交替冲了各30分钟，没有什么改善，是不是我没冲对呢？
谢谢！
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3楼2017-04-23 16:13:38
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淡淡幽雅

金虫 (著名写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by xiao杉儿 at 2017-04-23 16:13:38
首先谢谢您的回复
关于“好好冲下柱子及管路后再使用”，我之前用90%的水和90%的甲醇交替冲了各30分钟，没有什么改善，是不是我没冲对呢？
谢谢！...

采用循环冲柱程序：水相从90-70-40-10（中间需设平衡时间段），冲三个循环大概2-3个小时，冲洗完毕后采用标准样品进行测试，看保留时间是否稳定
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一入科研深似海，从此假日是路人
4楼2017-04-23 16:22:47
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