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machao8405

木虫 (正式写手)

[求助] 全长序列扩增已有3人参与

全长序列引物设计并没有太多的选择,扩增不出目的条带该怎么办?

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machao8405

木虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 本田透1990 at 2017-04-20 16:46:15
分段扩增,进行搭桥

这样错配几率会不会增加?我后期做过量表达用的

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4楼2017-04-21 07:28:52
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machao8405

木虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 本田透1990 at 2017-04-20 16:46:15
分段扩增,进行搭桥

关键序列也不长1000多  用分段搭桥么

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5楼2017-04-21 07:37:54
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machao8405

木虫 (正式写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 本田透1990 at 2017-04-21 08:32:21
序列这么短的话,你就可以考虑更换扩增方式,例如更换不同的酶,更换扩增条件,选用不同的pcr方式...

用了好多酶  降落加热启动都做了  没有明显目的条带  非特异扩增很多

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7楼2017-04-21 08:33:47
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