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铁杆木虫 (著名写手)

[交流] 枯草杆菌扫描电镜找不到菌体 已有3人参与

做的扫描电镜,但找不到菌体,前辈能不能指教一下
        前处理是:1)LB肉汤,4500rpm 收集菌体;2)0.2M PBS 洗涤菌体;3)加菌液到盖破片;4)2.5%戊二醛固定4h;5)50、70、80、90和100%乙醇梯度脱水:6)50和100%叔丁醇置换;7)冻干

枯草杆菌扫描电镜找不到菌体
菌1.png


枯草杆菌扫描电镜找不到菌体-1
菌1+抑制剂.png


枯草杆菌扫描电镜找不到菌体-2
菌2.png


枯草杆菌扫描电镜找不到菌体-3
菌2+抑制剂.png
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郑丽君-CC

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我的叔丁醇是固体的,请问100%叔丁醇还怎么做 的?
2楼2017-05-05 10:16:59
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gc1016670506

铁虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
2楼: Originally posted by 郑丽君-CC at 2017-05-05 10:16:59
我的叔丁醇是固体的,请问100%叔丁醇还怎么做 的?

直接买液体的不就完了,很贵吗?
3楼2017-05-05 16:07:01
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gc1016670506

铁虫 (初入文坛)

★ ★ ★ ★ ★
小冀-: 金币+5, 鼓励回帖交流 2017-05-06 12:04:45
收集对数生长期的新鲜菌液(过夜就差不多了),无菌水洗涤3次,置于2.5%戊二醛磷酸缓冲液(pH7.2)中,于4℃固定过夜;次日以0.15%的同一缓冲液冲洗;然后依次用40%、70%、90%和100%的乙醇分别脱水15 min;脱水后用醋酸戊脂置换乙醇;将上述样品于真空冷冻干燥机中干燥
4楼2017-05-05 16:08:20
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gc1016670506

铁虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我的枯草芽孢
枯草杆菌扫描电镜找不到菌体-4
2131.png

5楼2017-05-05 16:15:28
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BUA.刘政

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
您好,叔丁醇置换15分钟不就又凝固了,还有离心

发自小木虫Android客户端
6楼2017-12-28 10:08:24
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BUA.刘政

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by BUA.刘政 at 2017-12-28 10:08:24
您好,叔丁醇置换15分钟不就又凝固了,还有离心

离心用4℃也会凝固

发自小木虫Android客户端
7楼2017-12-28 10:09:01
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