应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 培养/筛选 » 半乳糖诱导高表达一个基因，目的菌株在平板上没有表型
51/1返回列表
查看: 1756  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

出芽酵母君

新虫 (初入文坛)

[求助] 半乳糖诱导高表达一个基因，目的菌株在平板上没有表型 已有2人参与

设计了一个半乳糖诱导一个基因高表达的载体，整合到了酿酒酵母的基因组里。然后将目的菌株梯度稀释后点在加有半乳糖的YP平板上。其他的课题组做出的表型很明显，在加有半乳糖的YP平板上目的菌株应该一点都不生长，野生型生长的很好。我的工作应该是重复出这个结果，但是不知道哪里有问题，目的菌株和野生型在加有半乳糖的YP平板上生长的一样好。我尝试过把酵母浸粉和蛋白胨替换成酵母氮源的培养基，完全剔除了葡萄糖的影响，但是表型还是一样的。求助大神，救我于水火。

发自小木虫Android客户端
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2017-04-19 17:19:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tyxh111

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 出芽酵母君 at 2017-07-28 08:15:22
嗯嗯，谢谢大家的关注。问题已经解决了，是试剂的问题。国产的试剂质量没有保障，换成了国外的全套培养基试剂后问题就解决了。

是培养基加2%半乳糖，120度30min灭菌吗
赞一下 回复此楼
8楼2017-11-16 10:22:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答

出芽酵母君

新虫 (初入文坛)
顺便加一句，正在尝试不同品牌的半乳糖，现在使用的是Amresco的半乳糖，还有一个国产的不知道什么牌子的半乳糖，都不好用。正在订sigma的半乳糖，还没有到。

发自小木虫Android客户端
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2017-04-19 17:26:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhaozhibozhi

金虫 (正式写手)
有可能蛋白未表达，或表达的非目的蛋白。检查一下表达载体序列是否错误，还可以WB分析一下

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

出芽酵母君
做一个阳光、开朗的小和尚
3楼2017-04-20 00:30:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

出芽酵母君

新虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by zhaozhibozhi at 2017-04-20 00:30:26
有可能蛋白未表达，或表达的非目的蛋白。检查一下表达载体序列是否错误，还可以WB分析一下

菌株已经WB分析了，没有问题。在加半乳糖之前蛋白不表达，加入半乳糖诱导后，蛋白表达。

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
4楼2017-04-25 07:18:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见，大家看看几个A，几个B? +4 Tide man 2026-08-11 4/200 2026-08-12 00:39 by liuqidi
[基金申请] 奇怪，两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +7 布布和一二 2026-08-10 9/450 2026-08-11 22:12 by 医学老男孩
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果？ +3 yuleib84 2026-08-11 3/150 2026-08-11 21:53 by jnhyjjm
[基金申请] 什么时候出结果，有咨询渠道？？？ +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +3 布布和一二 2026-08-11 4/200 2026-08-11 15:20 by aasahr
[论文投稿] 职称评审，求友友推荐见刊最快的期刊 +3 工厂打螺丝 2026-08-08 3/150 2026-08-11 13:42 by 会议编辑
[基金申请] FileCode能看出啥？ +7 要乐观耀哥 2026-08-10 17/850 2026-08-11 10:50 by 要乐观耀哥
[基金申请] 我的国基提前知道中了，可是同事的操作让我实在接受不了，怎么会有这样的人 +8 家与远方 2026-08-10 13/650 2026-08-11 09:49 by 家与远方
[基金申请] 确定了，国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 静等基金结果 +5 gjjjzhong 2026-08-10 16/800 2026-08-10 17:19 by Tide man
[基金申请] 好奇怪的filecode +4 布布和一二 2026-08-08 5/250 2026-08-10 14:20 by 冰心玉壶晴
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
[基金申请] 这样的filecode谁见过 +11 布布和一二 2026-08-08 22/1100 2026-08-10 11:10 by wmfsnow
[基金申请] filecode与中标关系的预测 +5 布布和一二 2026-08-07 5/250 2026-08-09 16:15 by 袁向阳007
[基金申请] 关于filecode +4 布布和一二 2026-08-07 7/350 2026-08-07 22:55 by zhanghaozhu
[基金申请] 化学口download_prp&fileCode的固定段好像这几天一直没变，有变的大神么？ +3 Tide man 2026-08-07 4/200 2026-08-07 22:39 by Tide man
[基金申请] 固定端突然变了，今天 +6 archvillain 2026-08-06 10/500 2026-08-07 16:03 by 医学老男孩
[基金申请] filecode变化情况 +6 布布和一二 2026-08-07 22/1100 2026-08-07 14:45 by 且听虎啸
[基金申请] 大家散了吧，后缀研究没有意义，别浪费时间了，过好目前的每一天，不要焦虑 +5 Tide man 2026-08-06 7/350 2026-08-07 13:11 by 医学老男孩
[基金申请] filecode +14 等待解的谜 2026-08-06 19/950 2026-08-07 12:20 by wlwhappy
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭