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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白电泳/WB » SDS-PAGE电泳问题求助，已经心力交瘁了。
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智明寻找春娇

新虫 (初入文坛)

[求助] SDS-PAGE电泳问题求助，已经心力交瘁了。 已有3人参与

最近在做WB,跑SDS-PAGE一直没有跑出来，甚至连溴酚蓝都跑不出来。
三天中换了如下部分
换了两种提蛋白的方法，研磨法和超声法
换了两种配胶方法，自己配的试剂制胶以及用试剂盒制胶。
换了不同的电泳仪以及电泳槽。




Marker也没有跑出来，所以求问什么原因！
从左到右分别是Buffer,Marker,Sample1-4,BUFFER
Sample1-4.中，1,2是同种样品不同煮沸时间用研磨法；3,4是同种样品不同煮沸时间用超声波法。

SDS-PAGE电泳问题求助，已经心力交瘁了。


SDS-PAGE电泳问题求助，已经心力交瘁了。-1


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1楼 2017-04-17 19:36:09
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

十四_14

荣誉版主 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
先考虑制胶以及电泳条件的问题  因为连marker都跑不出来  那很可能就是胶本身的问题
你的缓冲液pH合适么
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3楼2017-04-18 08:58:57
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
其实你应该换个人来做一遍WB。
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4楼2017-04-18 09:30:24
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大优仔

新虫 (初入文坛)
电极是不是插反了

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5楼2017-04-18 23:35:48
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旖秦

银虫 (小有名气)
会不会是电泳仪的珀金丝坏了？你带着自己的胶，电泳液去其他实验室试一试。

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10楼2017-04-19 14:48:16
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普通回帖

智明寻找春娇

新虫 (初入文坛)
希望高手来指点指点

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2楼2017-04-18 08:34:22
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zkapan

禁虫 (小有名气)
本帖内容被屏蔽
6楼2017-04-18 23:51:09
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alicelchf

木虫 (著名写手)
电极反了吧，跟样品没关

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修身、齐家、治国、平天下
7楼2017-04-18 23:56:26
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你也笑靥如花

新虫 (初入文坛)
看一下电极是不是反了，MARK都跑不出来，胶的问题也很大

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8楼2017-04-19 11:07:15
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QQ890914

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
1楼: Originally posted by 智明寻找春娇 at 2017-04-17 19:36:09
最近在做WB,跑SDS-PAGE一直没有跑出来，甚至连溴酚蓝都跑不出来。
三天中换了如下部分
换了两种提蛋白的方法，研磨法和超声法
换了两种配胶方法，自己配的试剂制胶以及用试剂盒制胶。
换了不同的电泳仪以及电泳槽。 ...

参考三楼，1.买商品化聚丙烯酰胺等；2.重新配置，调好ph

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9楼2017-04-19 12:49:01
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