应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » loading buffer 的作用
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
71/1返回列表
查看: 1227  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。

zqt123_1981

木虫 (小有名气)

[交流] loading buffer 的作用

我想知道在做PCR电泳时加loading buffer 的作用是什么？多点少点有没有影响

[ Last edited by 350784478 on 2009-10-23 at 13:22 ]
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2009-01-03 20:08:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★
350784478(金币+2,VIP+0): 10-23 13:22
1、增加样品比重，提高沉降率使得核酸能够沉进孔里
2、含有电泳指示剂，如溴酚蓝、二甲苯青等
3、还有一些含有SDS，能够中止酶促反应，加了之后可以灭活酶然后电泳回收核酸

多没关系，少就有关系
比如6X的就1 buffer+5 核酸，但是加少了可能沉不下去就飘出来了
多了无所谓
赞一下(11人) 回复此楼
2楼2009-01-03 21:19:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

changes

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2009-1-3 21:19:
1、增加样品比重，提高沉降率使得核酸能够沉进孔里
2、含有电泳指示剂，如溴酚蓝、二甲苯青等
3、还有一些含有SDS，能够中止酶促反应，加了之后可以灭活酶然后电泳回收核酸

多没关系，少就有关系
比如6X的就 ...

多了也有关系的，会造成背景强，二甲基苯兰的影响还是有的。六倍的就1：5混合上样呗。
赞一下 回复此楼
3楼2009-01-03 23:12:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
引用回帖:
Originally posted by changes at 2009/1/3, 23:12:

多了也有关系的，会造成背景强，二甲基苯兰的影响还是有的。六倍的就1：5混合上样呗。

我用后染法没发现染料增强背景的现象
跑胶回收一次load很多也不会~~
赞一下 回复此楼
4楼2009-01-04 00:28:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zqt123_1981

木虫 (小有名气)
我的PCR体系是20ul,完了加2ul 6x的loading buffer可以吧，
赞一下 回复此楼
5楼2009-01-04 10:14:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
2ul 6x
10ul 样品

反正就是按照1：5加就对了
loading buffer宁多勿少

……为何不理解6X的意思呢？
6X就是1X（工作浓度）的6倍啊
赞一下 回复此楼
6楼2009-01-04 10:52:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

月月大可

木虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by zqt123_1981 at 2009-1-4 10:14:
我的PCR体系是20ul,完了加2ul 6x的loading buffer可以吧，

太少了，你加的量只有1/11,6X指的是loading buffer含量为1/6，实际操作中都要求多于这个量，不然容易再加样时样品发飘，特别是电泳液用的次数较多，密度变大，更容易发飘。

[ Last edited by 月月大可 on 2009-1-4 at 15:35 ]
赞一下(1人) 回复此楼
7楼2009-01-04 15:33:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 zqt123_1981 的主题更新
71/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 071000生物学求调剂，初试成绩343 +6 小小甜面团 2026-03-25 6/300 2026-03-26 23:01 by 不吃魚的貓
[考研] 321求调剂 +6 wasdssaa 2026-03-26 6/300 2026-03-26 20:57 by sanrepian
[考研] 324求调剂 +4 wysyjs25 2026-03-21 4/200 2026-03-26 20:38 by fmesaito
[考研] 0703化学求调剂 +3 丹青奶盖 2026-03-26 5/250 2026-03-26 20:11 by macy2011
[考研] 化学工程085602 305分求调剂 +17 RichLi_ 2026-03-25 17/850 2026-03-26 19:44 by plmuchong
[考研] 352求调剂 +4 大米饭！ 2026-03-22 4/200 2026-03-26 16:40 by 不吃魚的貓
[考研] 北科281学硕材料求调剂 +17 tcxiaoxx 2026-03-20 19/950 2026-03-26 16:04 by 不吃魚的貓
[考研] 一志愿南航 335分 | 0856材料化工 | GPA 4.07 | 有科研经历 +6 cccchenso 2026-03-23 6/300 2026-03-25 22:25 by 544594351
[考研] 求调剂 +3 QiMing7 2026-03-25 3/150 2026-03-25 21:13 by 给你你注意休息
[考研] 生物技术与工程 +3 1294608413 2026-03-25 4/200 2026-03-25 18:02 by 1294608413
[考研] 网络空间安全0839招调剂 +4 w320357296 2026-03-25 6/300 2026-03-25 17:59 by 255671
[考研] 各位老师您好：本人初试372分 +5 jj涌77 2026-03-25 6/300 2026-03-25 14:15 by mapenggao
[考研] 化学调剂 +6 yzysaa 2026-03-21 6/300 2026-03-25 09:27 by aa331100
[考研] 289材料与化工（085600）B区求调剂 +4 这么名字咋样 2026-03-22 5/250 2026-03-25 08:20 by mx.yue
[考研] 300求调剂，材料科学英一数二 +5 leaflight 2026-03-24 5/250 2026-03-24 16:25 by laoshidan
[考研] 361求调剂 +3 Glack 2026-03-22 3/150 2026-03-23 22:03 by fuyu_
[考研] 293求调剂 +3 涛涛Wjt 2026-03-22 5/250 2026-03-22 22:21 by jiangpengfei
[考研] 308求调剂 +3 墨墨漠 2026-03-21 3/150 2026-03-22 16:54 by i_cooler
[考研] 298求调剂一志愿211 +3 上岸6666@ 2026-03-20 3/150 2026-03-22 15:50 by ColorlessPI
[考研] 求调剂 +3 @taotao 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:35 by JourneyLucky
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭