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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 新药研发 » 资料求助 » 开发PI3K抑制剂的Western blot结果
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chenzui0212

新虫 (小有名气)

[求助] 开发PI3K抑制剂的Western blot结果 已有2人参与

在做PI3K抑制剂对B淋巴瘤细胞SU-DHL-4的影响，加入的PI3K抑制剂浓度是0、5、10、15uM。结果发现做Western时，15uM的磷酸化AKT条带突然加重， 用的一抗是磷酸化的AKT。重复很多次，有时是5uM的磷酸化AKT条带突然加重，有时是10uM的磷酸化AKT条带突然加重。请问是哪种原因造成的。下面有图。

开发PI3K抑制剂的Western blot结果
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1楼 2017-04-13 21:14:13
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chenzui0212

新虫 (小有名气)
内参很齐

发自小木虫IOS客户端
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5楼2017-07-10 12:01:13
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kk1424

主管区长 (著名写手)

中药研究者

优秀区长优秀区长优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
“突然加重”意思就是表达量增加喽？
也就是同样的浓度，结果不一致吧？
你的取样温度和取样时间控制的怎么样？
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药理毒理
2楼2017-04-13 21:46:32
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chenzui0212

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by kk1424 at 2017-04-13 21:46:32
“突然加重”意思就是表达量增加喽？
也就是同样的浓度，结果不一致吧？
你的取样温度和取样时间控制的怎么样？

细胞的总蛋白浓度是一样的，预测的是随着药物浓度的升高，磷酸化的AKT的表达量应该是递减的。我是先用超声波破碎细胞，每次10秒，破碎了两次，又100度加热细胞裂解液10分钟。
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3楼2017-04-14 10:15:09
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君扬2009

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
为啥没有内参或本底呢？
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2017-04-15 10:38:31
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