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T4连接的问题 已有1人参与
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有A、B两个目的片段，A大小400bp，B大小1700bp，两个目的片段同时扩大，回收，T4处理，并同时连接3个不同载体，连接时间22度4h或16度过夜。挑斑检测，A阳性率90%,B阳性率0%，排除目的片段有问题的可能，请问哪里出了问题？ @wizardfan @biostar2009 发自小木虫IOS客户端 |
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jurkat.1640
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2楼2017-04-13 12:00:45
送红花一朵 |
谢谢你的解答，按照你所说的，如果我的B的量加少了，挑斑用两头通用引物检测会出现空载吗？因为我检测B的时候发现全部都是空载的片段大小，也就是B没有连上，然后载体发生自连了，可以这样解释吗，载体是用CpoI和NotI酶切的 发自小木虫IOS客户端 |
3楼2017-04-14 15:39:38
4楼2017-04-14 15:40:37
jurkat.1640
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5楼2017-04-14 16:44:25