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基因菜

新虫 (初入文坛)

[求助] 设计引物时的小问题

小白菜鸟一个啊刚刚接触初级实验室操作求大神指点! 我是要构建质粒,要插入一段目的基因,现在是用DNAMAN设计引物,求问
1. 下游引物前端要加上保护碱基和Sac I酶切位点的话,我自己编写下来的顺序应该是“保护碱基(三个)+酶切位点+目的基因CDS最末数个碱基(从后往前取)的互补碱基”吗?
2.下游引物用的酶识别位点本身就CG多,我的目的基因最后面也是CG巨多,保护碱基三个全用AT也没用……这样设计出来的引物发夹结构超大呀,这种情况怎么办呢?

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基因菜

新虫 (初入文坛)

真心迷了……求大佬指点一下啊!!!

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2楼2017-04-09 14:33:38
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