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znn19900505

铜虫 (小有名气)

[交流] 基因定量实验(qPCR,realtime PCR)问题咨询?已有6人参与

谁做过基因定量实验(qPCR,realtime PCR)帮我分析一个结果!图1、2为不加模板(cDNA,此处作为negative control )只加水的扩增曲线和熔解曲线,图3、4是正常实验组加模板(cDNA)的扩增曲线和熔解曲线!我的问题是:为什么只加水的阴性对照组也会出现扩增曲线和熔解曲线?这是正常的吗?如果是,为什么?如果不是,可能会是什么原因造成这样的结果?希望,做过的前辈帮忙指点一下!

基因定量实验(qPCR,realtime PCR)问题咨询?
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基因定量实验(qPCR,realtime PCR)问题咨询?-1
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基因定量实验(qPCR,realtime PCR)问题咨询?-2
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基因定量实验(qPCR,realtime PCR)问题咨询?-3
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lana_s

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
qpcr灵敏度很高 就算是水也跑的出来

发自小木虫IOS客户端
2楼2017-04-15 14:39:35
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匿名

用户注销 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
本帖仅楼主可见
3楼2017-04-21 11:04:37
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程yuxin

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我最近也出现无模板对照组有峰,你有没有在超净台里进行啊?应该是污染,环境DNA或者气溶胶都有可能
4楼2017-05-18 22:14:32
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梦幻心雨

银虫 (小有名气)


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你好,请问你的问题解决了吗?
科研工作于我若即若离。。。
5楼2017-05-25 20:00:33
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梦幻心雨

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by lana_s at 2017-04-15 14:39:35
qpcr灵敏度很高 就算是水也跑的出来

你好,如果是这种情况,怎么解决这种问题呢?谢谢!
科研工作于我若即若离。。。
6楼2017-05-25 20:01:33
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eroic生物

新虫 (正式写手)


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纵坐标不一样啊,如果你把两张图放一起就会发现阴性对照其实峰很低,但是你的实验组也有杂峰,估计引物特异性不好,或者有引物二聚体

发自小木虫Android客户端
7楼2019-03-26 16:05:46
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陈张军0622

铁虫 (初入文坛)


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溶解曲线出现非特异性扩增。对照组还是很低的
人生当苦
8楼2021-05-30 11:27:01
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