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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » notⅠ 酶切质粒受cG甲基化影响，我改换什么感受态细胞克隆质粒?
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yoki喵

新虫 (初入文坛)

[求助] notⅠ 酶切质粒受cG甲基化影响，我改换什么感受态细胞克隆质粒? 已有2人参与

最近在使用notⅠ酶切我的一个质粒构建载体，但是做了好几遍都没有切成功。查资料才发现notⅠ受CG甲基化影响，我的质粒刚好是从DH5α中提取出来的，那么notⅠ酶切位点会被CG甲基化吗?有人说换JM110感受态克隆质粒就不会被甲基化修饰了，可我查了一下JM100菌株是dam dcm甲基化酶缺失，却没有注明CG甲基化酶缺失，那我可以用JM110吗?关于甲基化方面的知识实在缺少，希望有人帮帮我，谢谢了!

@biostar2009 @飞约疯人院 @wizardfan 发自小木虫Android客户端
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1楼 2017-04-04 22:14:35
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
一定是你酶切的问题。我用DH5a扩增的质粒也能用这个酶切。
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2楼2017-04-05 16:22:40
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yoki喵

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by jurkat.1640 at 2017-04-05 16:22:40
一定是你酶切的问题。我用DH5a扩增的质粒也能用这个酶切。

谢谢，请问你用的是什么公司的酶

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3楼2017-04-05 20:24:47
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cs冰凝

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

就是用JM110的感受态细胞！你可以看看唯地生物的！他们专门研究感受态细胞
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唯地生物，您身边的感受态专家
4楼2017-06-08 18:20:49
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