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边木殇木虫 (小有名气)
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求细菌包被96孔板方法 已有2人参与
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最近在做毛滴虫和支原体的表面抗原与抗体筛选实验，用的全细胞10^6每孔，50nM NaHCO3缓冲液 4度过夜包被96板，之后步骤跟indirect ELISA 一样。但是结果OD值很低，怀疑细胞没有包被到板子上，或者中间洗板的时候掉了很多。所以想求个细菌全细胞 ELISA 实验方法！！！ ps. 最好不是超声裂解细胞提碎片蛋白的方法，只要细胞表面蛋白做抗原， 所以尽量保持细胞完整性最好 |
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yyy0305
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5楼2017-07-26 09:08:44
边木殇
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【答案】应助回帖
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边木殇: 金币+150, ★有帮助, 你做的是动物细胞吗？还是癌细胞？ 2017-07-26 08:22:35
边木殇: 金币+150, ★有帮助, 你做的是动物细胞吗？还是癌细胞？ 2017-07-26 08:22:35
| 你这个是包被蛋白的套路，我做了些cell-based ELISA，一般是用培养基种板10^5个过夜，第二天细胞贴壁后拿4%的多聚甲醛固定，封闭后加入一抗二抗进行。通过显微镜可以时刻观察在各个实验过程中细胞是否贴在板子上。不太了解你的毛滴虫和支原体的情况，仅供参考。 |
4楼2017-07-25 09:18:03
