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一只小袋鼠

新虫 (初入文坛)

[交流] 怎么用taq酶加ployA尾,具体体系怎么加? 已有8人参与

本人用KOD酶扩完了基因,然后要连接T载体,但是没有ployA尾,需要自己加上,用taq酶,但是因为是菜鸟所以不知道体系怎么加,求大神指导啊

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路人甲007

木虫 (正式写手)

小七


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为什么要用T载体  直接放到你的目的载体里不就可以了
与人玫瑰手有余香
2楼2017-03-31 20:42:19
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atlanticwi

金虫 (正式写手)

琴美喜欢发呆 不喜欢发脾气


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10微升体系,8.7 的产物;1 的buffer;0.1的酶;0.2 的dATP(或dNTP)
反应过程,72度30 min即可
Let God do with it as He wills
3楼2017-03-31 22:37:44
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甲方不怕乙方

木虫 (正式写手)


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Taq酶的说明书里有啊,反应体系和条件都有时间

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我要让你的生活因为有我而更精彩
4楼2017-04-01 10:03:25
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六维空想

新虫 (小有名气)


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按照多少体系加就可以了  72℃半个小时

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5楼2017-04-01 15:38:04
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宁文峰

新虫 (小有名气)


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直接使用一些高保真酶就可以了,常规pcr就可以加A,然后直接连t载,,TAKARA就有

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所追求的不在明天,而在现在以前
6楼2017-04-01 17:32:21
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邹忌

铁杆木虫 (小有名气)


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taq酶可以直接在尾部加上A,再连接T载体即可
不是不能,只是不想
7楼2017-04-02 09:32:59
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ztt279

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我是在用高保真酶pcr后,直接再用taq酶pcr,就加a了

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8楼2017-04-02 10:54:34
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挑战来了

新虫 (小有名气)


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引用回帖:
8楼: Originally posted by ztt279 at 2017-04-02 10:54:34
我是在用高保真酶pcr后,直接再用taq酶pcr,就加a了

你好,请问一下用高保真扩了之后是纯化后再用Taq酶加A吗?

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9楼2017-09-10 08:32:26
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