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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 怎么用taq酶加ployA尾，具体体系怎么加？
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一只小袋鼠

新虫 (初入文坛)

[交流] 怎么用taq酶加ployA尾，具体体系怎么加？ 已有8人参与

本人用KOD酶扩完了基因，然后要连接T载体，但是没有ployA尾，需要自己加上，用taq酶，但是因为是菜鸟所以不知道体系怎么加，求大神指导啊

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1楼 2017-03-31 20:17:19
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路人甲007

木虫 (正式写手)

小七
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
为什么要用T载体  直接放到你的目的载体里不就可以了
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与人玫瑰手有余香
2楼2017-03-31 20:42:19
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atlanticwi

金虫 (正式写手)

琴美喜欢发呆 不喜欢发脾气
★
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10微升体系，8.7 的产物；1 的buffer；0.1的酶；0.2 的dATP（或dNTP）
反应过程，72度30 min即可
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Let God do with it as He wills
3楼2017-03-31 22:37:44
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甲方不怕乙方

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
Taq酶的说明书里有啊，反应体系和条件都有时间

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我要让你的生活因为有我而更精彩
4楼2017-04-01 10:03:25
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六维空想

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
按照多少体系加就可以了  72℃半个小时

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5楼2017-04-01 15:38:04
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宁文峰

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
直接使用一些高保真酶就可以了，常规pcr就可以加A，然后直接连t载，，TAKARA就有

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所追求的不在明天，而在现在以前
6楼2017-04-01 17:32:21
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邹忌

铁杆木虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
taq酶可以直接在尾部加上A，再连接T载体即可
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不是不能，只是不想
7楼2017-04-02 09:32:59
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ztt279

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我是在用高保真酶pcr后，直接再用taq酶pcr，就加a了

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8楼2017-04-02 10:54:34
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挑战来了

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
8楼: Originally posted by ztt279 at 2017-04-02 10:54:34
我是在用高保真酶pcr后，直接再用taq酶pcr，就加a了

你好，请问一下用高保真扩了之后是纯化后再用Taq酶加A吗？

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9楼2017-09-10 08:32:26
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