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一只小袋鼠

新虫 (初入文坛)

[交流] 怎么用taq酶加ployA尾,具体体系怎么加? 已有8人参与

本人用KOD酶扩完了基因,然后要连接T载体,但是没有ployA尾,需要自己加上,用taq酶,但是因为是菜鸟所以不知道体系怎么加,求大神指导啊

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挑战来了

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
8楼: Originally posted by ztt279 at 2017-04-02 10:54:34
我是在用高保真酶pcr后,直接再用taq酶pcr,就加a了

你好,请问一下用高保真扩了之后是纯化后再用Taq酶加A吗?

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9楼2017-09-10 08:32:26
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查看全部 9 个回答

路人甲007

木虫 (正式写手)

小七


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
为什么要用T载体  直接放到你的目的载体里不就可以了
与人玫瑰手有余香
2楼2017-03-31 20:42:19
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atlanticwi

金虫 (正式写手)

琴美喜欢发呆 不喜欢发脾气


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
10微升体系,8.7 的产物;1 的buffer;0.1的酶;0.2 的dATP(或dNTP)
反应过程,72度30 min即可
Let God do with it as He wills
3楼2017-03-31 22:37:44
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甲方不怕乙方

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
Taq酶的说明书里有啊,反应体系和条件都有时间

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我要让你的生活因为有我而更精彩
4楼2017-04-01 10:03:25
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