24小时热门版块排行榜    

查看: 1084  |  回复: 3
当前主题已经存档。

erictan2046

铜虫 (正式写手)

[交流] [求助] 何谓PCR的终浓度?

问题:

(1)何谓PCR的终浓度?是怎么计算的?
PCR的反应体系与反应条件:

10x PCR buffer 10ul
4种dNTP 混合液 各 200umol/L
引物 各10~100pmol
模板 DNA 0.1~2ug
Taq DNA 聚合酶 2.5U
Mg2+ 1.5mmol/L
ddH20 至 100uL

是不是PCR的反应体系是咱们自己设定的???一定要到100ul那么多吗?还有各个参数是什么计算出来要加多少uL的???

终浓度又是什么?
希望各路高手帮忙和能得到满意的答复!谢谢
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

网上的很多资料很误导的
第一次就扩100ul,万一挂了很浪费试剂
终浓度就是各组分在最后混好的100ul或者50ul之类的最终浓度
比如25mM的Mgcl2溶液,加1ul,最后在最终体积为100ul的反应体系中,就是终浓度为0.25mM了。当然实际上PCR对Mg的浓度要求远高于此

建议你看看教科书吧~~都有的
还有Taq酶的说明书
2楼2008-12-30 23:12:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cjl2008bio

铜虫 (初入文坛)

你买的taq酶肯定都带有10倍浓度缓冲液的吧,里面有的自动含有镁离子,有的额外加一管专门的镁离子溶液,按照其指示的浓度倍数配到1倍浓度就行。taq酶加1u或者0.5u其实都可以有很好的效果,反应体系25ml。
3楼2008-12-31 10:40:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cjl2008bio

铜虫 (初入文坛)

打错了  反应体系25微升
4楼2009-01-01 11:29:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 erictan2046 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 349求调剂 +3 杰斯塔里斯 2026-03-21 3/150 2026-03-26 20:47 by fmesaito
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +3 崔wj 2026-03-26 3/150 2026-03-26 19:57 by nihaoar
[考研] 化学工程085602 305分求调剂 +17 RichLi_ 2026-03-25 17/850 2026-03-26 19:44 by plmuchong
[考研] 中国科学院深圳先进技术研究院-光纤传感课题组招生-中国科学院大学、深圳理工大学联培 +5 YangTyu1 2026-03-26 5/250 2026-03-26 18:27 by 猫咪猫咪呀
[考研] 275求调剂 +9 Micky11223 2026-03-25 11/550 2026-03-26 15:54 by 不吃魚的貓
[考研] 材料与化工考研调剂 +10 孅華 2026-03-22 10/500 2026-03-26 15:40 by zzll406
[考研] 一志愿河工大 081700 276求调剂 +4 地球绕着太阳转 2026-03-23 4/200 2026-03-26 14:27 by zzll406
[考研] 0856求调剂 +8 zhn03 2026-03-25 9/450 2026-03-26 13:42 by zzll406
[考研] 296求调剂 +5 www_q 2026-03-20 5/250 2026-03-26 12:56 by 3Strings
[考研] 材料与化工328分调剂 +6 。,。,。,。i 2026-03-23 6/300 2026-03-25 22:30 by 418490947
[考研] 347求调剂 +4 L when 2026-03-25 4/200 2026-03-25 13:37 by cocolv
[考研] 289求调剂 +9 怀瑾握瑜l 2026-03-20 9/450 2026-03-25 11:02 by userper
[考研] 086003食品工程求调剂 +6 淼淼111 2026-03-24 6/300 2026-03-25 10:29 by 3Strings
[考研] 340求调剂 +5 话梅糖111 2026-03-24 5/250 2026-03-25 06:53 by ilovexiaobin
[考研] 上海电力大学材料防护与新材料重点实验室招收调剂研究生(材料、化学、电化学,环境) +4 我爱学电池 2026-03-23 4/200 2026-03-25 00:59 by 1027_324
[考研] 一志愿华东理工大学081700,初试分数271 +5 kotoko_ik 2026-03-23 6/300 2026-03-24 10:29 by 学术搬砖er
[考研] 336化工调剂 +4 王大坦1 2026-03-23 5/250 2026-03-23 18:32 by allen-yin
[考研] 298求调剂 +8 上岸6666@ 2026-03-20 8/400 2026-03-23 11:02 by laoshidan
[考研] 一志愿华中科技大学071000,求调剂 +4 沿岸有贝壳6 2026-03-21 4/200 2026-03-22 07:21 by ilovexiaobin
[考研] 一志愿西安交通大学 学硕 354求调剂211或者双一流 +3 我想要读研究生 2026-03-20 3/150 2026-03-20 20:13 by JourneyLucky
信息提示
请填处理意见