| 查看: 682 | 回复: 2 | ||
[求助]
蛋白质的分离纯化 已有1人参与
|
|
第一次做蛋白分离纯化，请问在目的蛋白N段加个His-Tag，应该怎么做？ 应该加在启动子后(起始密码子前)吗？或者如果加在C端，就是终止密码子后(终止子前)吗？ 发自小木虫Android客户端 |
回复此楼» 猜你喜欢
售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急
已经有8人回复
-
售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急
已经有5人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急
已经有8人回复
-
售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急
已经有11人回复
-
售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急
已经有11人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急
已经有8人回复
-
售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急
已经有10人回复
-
售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急
已经有12人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急
已经有8人回复
-
售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急
已经有10人回复
medi812
新虫 (初入文坛)
- 应助: 4 (幼儿园)
- 金币: 53.2
- 帖子: 20
- 在线: 1.9小时
- 虫号: 5918349
- 注册: 2017-03-10
- 性别: GG
- 专业: 微生物生理与生物化学
|
N端要在met后面，可以直接连也可以加个linker 要是放在c端要放在终止密码前面 放后面就不表达了 pET系统里面可以有很多选择的 看看你目标蛋白哪一边比较重要 tag就放在不太重要那边 最好纯化后切掉 选个酶切位点放在tag和蛋白中间 发自小木虫IOS客户端 |
2楼2017-03-30 00:51:25
medi812
新虫 (初入文坛)
- 应助: 4 (幼儿园)
- 金币: 53.2
- 帖子: 20
- 在线: 1.9小时
- 虫号: 5918349
- 注册: 2017-03-10
- 性别: GG
- 专业: 微生物生理与生物化学
【答案】应助回帖
★ ★
感谢参与，应助指数 +1
鸿鹄00000: 金币+2, ★★★很有帮助 2017-03-30 08:47:48
感谢参与，应助指数 +1
鸿鹄00000: 金币+2, ★★★很有帮助 2017-03-30 08:47:48
|
补充一下 his的纯化纯度不高 要么你必须加大你目标蛋白的表达 要么你下游换了buffer之后再做离子交换 发自小木虫IOS客户端 |
3楼2017-03-30 00:52:28
