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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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卡拉

新虫 (初入文坛)

[交流] 用了高保真酶如何在PCR产物后加A ? 连在T载体上

我用了不再不在PCR产物后加A 的Pfu 高保真酶  我该怎么让他加上A  ? 让他连在T 载体上啊? 在这里先谢谢大家
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广州东盛


lwf991229(金币+1,VIP+0):感谢参与讨论~
由高保真DNA 聚合酶(如Pfu)产生的PCR 片段的纯化产物1-7ul
    加入1ul Taq DNA 聚合酶10×反应缓冲液(含MgCl2);
    加入dATP 至终浓度0.2 mM;
    加入5 U的Taq DNA 聚合酶;
    加超纯水至终反应体积为10ul;
    70℃孵育15-30 分钟;
    进行TA克隆。
5楼2008-12-30 17:27:28
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朱静华

铜虫 (初入文坛)


lwf991229(金币+1,VIP+0):感谢参与讨论~
有加A反应液,连接前做个加A反应就可以了
2楼2008-12-30 15:26:38
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jasco

木虫 (正式写手)

用普通taq,72度30min,即可
4楼2008-12-30 16:46:38
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卡拉

新虫 (初入文坛)

谢谢大家的帮助 我好像没有 dATP   直接加 Taq mix  不知道 行不行?
6楼2008-12-31 21:38:15
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