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小李纸11

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[求助] 酵母电转后长出奇怪的菌落。。。已有3人参与

最近在用毕赤酵母表达外源蛋白，电转后估计是涂的太浓了，完全没有单菌落，直接是白色的一厚层，越长越厚，并有浓烈的酒味，按理来说该是酵母啊，，，因为没办法挑单菌落，就直接用牙签刮了一层到加了抗菌筛选剂的液体培养基，培养两天后用这个菌液经过离心，加水煮冻煮冻后做了PCR，用特异性引物也能P出目的条带来，然后就用这个菌液又划了有抗生素的平板，但过了一晚就长出了菌落，而且明显不是酵母菌，菌落发黄，还有些透明，像大肠杆菌似的，，，怎么回事啊。。。我该怎么处理才能筛出酵母呢？

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1楼 2017-03-28 11:01:00

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小冀-

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【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

可能是菌落不纯，重新调单菌落吧~还有就是电转之后会长这么多菌吗？不会电转的时候就已经染菌了吧

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2楼2017-03-28 12:00:05

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小李纸11

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2楼: Originally posted by 小冀- at 2017-03-28 12:00:05
可能是菌落不纯，重新调单菌落吧~还有就是电转之后会长这么多菌吗？不会电转的时候就已经染菌了吧

关键是完全没有单菌落啊，直接一厚层，实在是涂太多了，，，不知道什么时候染的菌，但是有很浓的酒味，感觉就算是染菌也该有酵母在里面才对啊，，，为什么划了平板没长出一个像酵母的菌落呢。。。

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3楼2017-03-28 12:05:50

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小冀-

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3楼: Originally posted by 小李纸11 at 2017-03-28 12:05:50
关键是完全没有单菌落啊，直接一厚层，实在是涂太多了，，，不知道什么时候染的菌，但是有很浓的酒味，感觉就算是染菌也该有酵母在里面才对啊，，，为什么划了平板没长出一个像酵母的菌落呢。。。...

可能杂菌比例太高了也说不定~而且电转的时候大部分的菌应该都被电死了吧，长了那么多肯定有问题的

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4楼2017-03-28 14:33:39

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