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洛ye清寒金虫 (小有名气)
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[求助]
肠道菌群的冻存及复苏 已有1人参与
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求助肠道菌群的冻存和复苏! 自己提取的肠道菌群,加入了20%的甘油,直接放在-80℃冰箱冻存,复苏的时候37℃水浴溶解加在培养基中温孵24h,发现菌并没有长起来,而且也没有活力了~到底问题出在哪里 不知道是不是我的步骤出现了问题。大部分问的是细胞的冻存和复苏,没有看到细菌,特别是厌氧菌的冻存和复苏,实验室也没有人做过,请问大家,冻存的时候也要像细胞一样慢冻吗?复苏的时候,37℃水浴快融,加培基的比例一般是多少,需要离心除掉含有甘油的液体培养基吗? 复苏之后的细菌我温孵了24小时之后再进行实验。需要保持严格的厌氧条件吗?… 或者有人有这方面的经验吗?谢谢大家! @天使托 发自小木虫Android客户端 |
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2楼2017-03-27 20:38:57

3楼2017-05-03 10:04:31
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以上说法不敢苟同!据我所知,肠道菌大多为好氧与兼性厌氧,如大肠菌群;非要说有厌氧,那也是乳酸菌一类,而且这也是微氧居多。说正题,楼主冻存用冻存盒了吗?没有的话,直接放-80是会冻死的,要梯度降温;还有你没有说明甘油终浓度多少,即混合比例多少,一般是终浓度10-20。冻存用慢冻速融没毛病。 发自小木虫Android客户端 |
4楼2017-05-04 01:54:51













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