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xxxr630

新虫 (初入文坛)

[求助] 定量PCR标准曲线低浓度未扩增,求疑

小白做16S细菌qPCR标准曲线遇到问题,共做8个梯度,在前3个梯度是正常扩增,但是在后5个低浓度梯度根本没有扩增,都是10倍稀释,求指导
已经排除质粒因素,SYBR Green 1 酶扩增,反应程序为94℃ 5S,58℃ 15S,72℃ 10S,40个循环,机器是Roche的Lightcycler480

定量PCR标准曲线低浓度未扩增,求疑
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定量PCR标准曲线低浓度未扩增,求疑-1
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xxxr630

新虫 (初入文坛)

如图1所示,前3个梯度正常扩增,后5个未扩增,浓度为1.5E9至E2
图2,红色即是前3梯度,单峰正常,蓝色为后5个梯度,峰直接提前,看不懂什么意思
跪求大神指导
2楼2017-03-27 16:14:49
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lihopcr

新虫 (初入文坛)

3楼2017-04-05 08:17:46
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lihopcr

新虫 (初入文坛)

看溶解曲线,像是低浓度的被抑制了,但是1.5E6浓度也不低

发自小木虫Android客户端
4楼2017-04-05 08:19:38
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daming_yj

铜虫 (小有名气)

楼主请问你的问题解决了么?我也出现了类似的情况
5楼2018-08-08 11:42:08
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