24小时热门版块排行榜    

查看: 1508  |  回复: 4
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

xxxr630

新虫 (初入文坛)

[求助] 定量PCR标准曲线低浓度未扩增,求疑

小白做16S细菌qPCR标准曲线遇到问题,共做8个梯度,在前3个梯度是正常扩增,但是在后5个低浓度梯度根本没有扩增,都是10倍稀释,求指导
已经排除质粒因素,SYBR Green 1 酶扩增,反应程序为94℃ 5S,58℃ 15S,72℃ 10S,40个循环,机器是Roche的Lightcycler480

定量PCR标准曲线低浓度未扩增,求疑
(ED{QM382(UFDY1E17587GE.png


定量PCR标准曲线低浓度未扩增,求疑-1
N6@6UNWZVSMI}T0VBCLRTZQ.png
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lihopcr

新虫 (初入文坛)

3楼2017-04-05 08:17:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答

xxxr630

新虫 (初入文坛)

如图1所示,前3个梯度正常扩增,后5个未扩增,浓度为1.5E9至E2
图2,红色即是前3梯度,单峰正常,蓝色为后5个梯度,峰直接提前,看不懂什么意思
跪求大神指导
2楼2017-03-27 16:14:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lihopcr

新虫 (初入文坛)

看溶解曲线,像是低浓度的被抑制了,但是1.5E6浓度也不低

发自小木虫Android客户端
4楼2017-04-05 08:19:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

daming_yj

铜虫 (小有名气)

楼主请问你的问题解决了么?我也出现了类似的情况
5楼2018-08-08 11:42:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 316求调剂 +9 梁茜雯 2026-03-19 9/450 2026-03-25 23:01 by peike
[考研] 招08考数学 +8 laoshidan 2026-03-20 17/850 2026-03-25 17:52 by 一个红太阳
[考研] 材料277求调剂 +4 min3 2026-03-24 4/200 2026-03-25 15:29 by fch1983
[考研] 求调剂323材料与化工 +4 1124361 2026-03-24 4/200 2026-03-25 11:19 by shulmg
[考研] 340求调剂 +5 话梅糖111 2026-03-24 5/250 2026-03-25 06:53 by ilovexiaobin
[考研] 生物学学硕求调剂 +7 小羊睡着了? 2026-03-23 10/500 2026-03-25 02:24 by 清风拂扬。 m
[考研] 一志愿武理085500机械专业总分300求调剂 +3 an10101 2026-03-24 7/350 2026-03-25 00:00 by 山鬼0-
[考研] 277分求调剂,跨调材料 +3 考研调剂lxh 2026-03-24 3/150 2026-03-24 13:52 by JourneyLucky
[考研] 341求调剂(一志愿湖南大学070300) +5 番茄头--- 2026-03-22 6/300 2026-03-23 23:45 by Txy@872106
[考研] 291求调剂 +8 hhhhxn.. 2026-03-23 8/400 2026-03-23 23:15 by peike
[考研] 350求调剂 +6 weudhdk 2026-03-19 6/300 2026-03-23 15:47 by tangyuan0840221
[考研] 311求调剂 +3 26研0 2026-03-20 3/150 2026-03-22 14:46 by ColorlessPI
[考研] 一志愿北京化工大学070300 学硕336求调剂 +5 vv迷 2026-03-21 8/400 2026-03-22 14:20 by ColorlessPI
[基金申请] 山东省面上项目限额评审 +4 石瑞0426 2026-03-19 4/200 2026-03-22 08:50 by Wei_ren
[考研] 求调剂 +3 13341 2026-03-20 3/150 2026-03-21 18:28 by 学员8dgXkO
[考研] 材料 271求调剂 +5 展信悦_ 2026-03-21 5/250 2026-03-21 17:29 by 学员8dgXkO
[基金申请] 学校已经提交到NSFC,还能修改吗? 40+4 babangida 2026-03-19 9/450 2026-03-21 16:12 by babangida
[考研] 材料与化工(0856)304求 B区 调剂 +3 邱gl 2026-03-21 3/150 2026-03-21 13:47 by lature00
[考研] 22 350 本科985求调剂,求老登收留 +3 李轶男003 2026-03-20 3/150 2026-03-21 13:28 by 搏击518
[考研] 材料学硕297已过四六级求调剂推荐 +11 adaie 2026-03-19 11/550 2026-03-20 21:30 by laoshidan
信息提示
请填处理意见