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洛神惟惟

新虫 (正式写手)
引用回帖:
10楼: Originally posted by 我欲乘风归去 at 2017-03-26 23:36:20
你扩增的引物是cDNA水平还是基因组水平的，如用cDNA水平的引物 且基因组有内含子，得到的就是比在cDNA上的大小要大，如果是用基因组水平的引物做验证，拖带表示引物的特异性不好，重新设计引物或者试试做touchdown  ...

首先谢谢您，我用的是cDNA水平的引物，然后模板也是用RNA反转录得到的cDNA,理论上是没有内含子的，昨天把延伸时间缩短了，分别为45s和30s，结果还是只有在600bp左右有带，这个到底是什么问题呀，

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11楼2017-03-27 10:03:29
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2298827423

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
感觉应该是引物不太好，我一般都会重新设计引物，多设计几对，特异性好了，就好扩增了
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12楼2017-03-27 21:46:51
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艰苦温度

新虫 (小有名气)
有图吗

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13楼2017-03-27 22:34:52
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洛神惟惟

新虫 (正式写手)
引用回帖:
12楼: Originally posted by 2298827423 at 2017-03-27 21:46:51
感觉应该是引物不太好，我一般都会重新设计引物，多设计几对，特异性好了，就好扩增了

嗯嗯，我也意识到可能引物有点问题，我准备再设计几对试一试

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14楼2017-03-28 11:51:52
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洛神惟惟

新虫 (正式写手)
引用回帖:
13楼: Originally posted by 艰苦温度 at 2017-03-27 22:34:52
有图吗

没有拍图，确实只在550到600bp之间有条带

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15楼2017-03-28 11:53:29
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冷雁孤旅

木虫 (著名写手)
内容已删除
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生命不息奋斗不止
16楼2017-03-29 08:37:32
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洛神惟惟

新虫 (正式写手)
内容已删除
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17楼2017-03-29 21:18:57
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