[交流] 腺相关病毒（rAAV6）感染星形胶质细胞的体内外研究 已有1人参与

腺相关病毒载体是越来越受欢迎的载体工具，它可将基因输送到中枢神经系统，具有非致病性、免疫原性低、可感染分裂细胞和非分裂细胞的特点。它的一个局限性是对神经类细胞的感染有取向性，神经胶质细胞特别是星形胶质细胞的感染效率很低。为了克服这个局限，先前的研究中利用星形胶质细胞的特异性的启动子来构建载体包装病毒，以及用不同血清型的病毒来感染星形胶质细胞，但是各种研究中的感染效率并不一致。在本实验中，我们测试了7种商业化的腺相关病毒的血清型，血清型1、2、5、6、7、8、9（腺相关病毒由维真生物提供），通过观察绿色荧光蛋白（GFP）的表达来测试各种血清型病毒感染星形胶质细胞的能力。在细胞培养中，rAAV6表现出稳定的高效的感染效率，而rAAV2只有一些批次的病毒对星形胶质细胞有感染性。为了证明我们所用的病毒活性没有问题，我们将所用病毒感染公认的易感染细胞ARPE-19细胞并都表现出很高的感染性。基于体外实验结果，我们选用rAAV6和rAAV2进行了体内实验，同样条件下感染星形胶质细胞和神经元细胞，感染3个星期后，对病毒表达蛋白GFP、神经元细胞特异性标志蛋白NeuN以及星形胶质细胞特异性标志蛋白GFAP进行免疫染色，我们发现rAAV6对星形胶质细胞有很高的感染率（90%以上细胞被感染），但是对神经元细胞的感染率很低（约10%感染率），相反地，rAAV2对神经元细胞有高感染率（约65%），但是不易感染星形胶质细胞（约20%）。总之，我们的研究表明rAAV6能够被用作对体内星形胶质细胞进行基因表达调控（过表达或敲低）的工具。

回复此楼