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为什么诱导表达一直是包涵体? 已有4人参与
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| 目的基因连接至pet28a,转化至大肠杆菌BL21(DE3)进行诱导表达,但是无论怎么优化诱导条件,蛋白都是以包涵体形式存在。应该怎么做才会得到可溶性蛋白呢? |
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西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2017-03-24 07:50:51
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2017-03-24 07:50:51
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外源蛋白本身就容易表达成包涵体,可以做下疏水性预测,越疏水越易行成包涵体。可以尝试低温诱导,低转速,改变培养基条件,或者换gst吧 发自小木虫Android客户端 |
7楼2017-03-22 23:34:13

2楼2017-03-22 16:05:27
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3楼2017-03-22 17:58:09
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我能说一下么,老师讲的一个例子,她师妹的导师讨厌包涵体,但是给了她一个载体,让他做条件优化,大半年了,都是包涵体,然后发现,这个载体就是为包涵体表达而设计的,还有你这个载体的宿主匹配么。 发自小木虫Android客户端 |
5楼2017-03-22 22:56:15
15113546664
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6楼2017-03-22 22:58:34
xinxiyuzhou
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