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竹林之秋

新虫 (初入文坛)

[求助] Hplc测定 已有2人参与

请问在测定样品时,峰为什么会拖尾这么严重,怎么改善

Hplc测定


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竹林之秋

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by chjm1016 at 2017-03-22 12:31:23
峰型不算特别差,可以尝试将洗脱梯度的上升速率提高,能使峰型更尖锐一些,加大淋洗液流量也有所帮助。

您说的梯度洗脱的上升速率提高是怎么操作的呢?我的样品是单组分物质,需要梯度洗脱吗?

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6楼2017-03-22 19:58:26
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胶原蛋白886

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
1.色谱柱污染、如果色谱柱开始使用时峰形正常,使用一段时间后逐渐出现峰拖尾,则色谱柱被污染的可能性很大,可以冲洗一下柱子,或者换一根尝试下。
2.样品过载。进样量太多,减少进样体积。
3.大峰后面有小峰出现,可以用PDA检测器检测一下样品纯度。
4.流动相PH值。流动相的pH 在样品的pKa附近时,样品解离平衡不充分,容易出现前伸峰或拖尾峰,pH应尽量选在样品pKa±1.5以外 。

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2楼2017-03-22 11:08:28
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chjm1016

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
峰型不算特别差,可以尝试将洗脱梯度的上升速率提高,能使峰型更尖锐一些,加大淋洗液流量也有所帮助。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

3楼2017-03-22 12:31:23
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竹林之秋

新虫 (初入文坛)

送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by 胶原蛋白886 at 2017-03-22 11:08:28
1.色谱柱污染、如果色谱柱开始使用时峰形正常,使用一段时间后逐渐出现峰拖尾,则色谱柱被污染的可能性很大,可以冲洗一下柱子,或者换一根尝试下。
2.样品过载。进样量太多,减少进样体积。
3.大峰后面有小峰出现 ...

超级感谢您的帮助

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4楼2017-03-22 19:38:58
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