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渭城朝风

新虫 (初入文坛)

[求助] 疏水层析纯化多克隆抗体 已有2人参与

哪位高手用疏水层析纯化过多克隆抗体,能给点方法吗?多少盐浓度结合,多少盐浓度多抗被洗脱?谢谢!
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希望大家互相学习互相交流
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hc-material

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
疏水层析,是高盐上样,一般是2M的硫酸氨上样,用低浓度的盐洗脱,洗脱方式可以拉梯度即逐渐降低盐的浓度洗脱。
2楼2017-03-22 11:13:18
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liaohongjun

铁虫 (小有名气)

上样硫酸铵浓度应该通过预实验确定,再选择合适疏水强度的柱子,洗脱先用梯度洗脱,确定目标蛋白洗脱浓度后再改为阶段洗脱!

发自小木虫Android客户端
3楼2017-03-22 16:42:57
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掌控恶魔

新虫 (小有名气)


【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
多抗你还是用Protein A纯化和抗原亲和纯化吧。。硫酸铵沉淀法会抗议有影响
4楼2017-03-23 13:43:57
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