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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 抗体/Elisa » 疏水层析纯化多克隆抗体
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渭城朝风

新虫 (初入文坛)

[求助] 疏水层析纯化多克隆抗体 已有2人参与

哪位高手用疏水层析纯化过多克隆抗体，能给点方法吗？多少盐浓度结合，多少盐浓度多抗被洗脱？谢谢！
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希望大家互相学习互相交流
1楼 2017-03-22 09:01:26
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hc-material

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
疏水层析，是高盐上样，一般是2M的硫酸氨上样，用低浓度的盐洗脱，洗脱方式可以拉梯度即逐渐降低盐的浓度洗脱。
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2楼2017-03-22 11:13:18
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liaohongjun

铁虫 (小有名气)
上样硫酸铵浓度应该通过预实验确定，再选择合适疏水强度的柱子，洗脱先用梯度洗脱，确定目标蛋白洗脱浓度后再改为阶段洗脱！

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3楼2017-03-22 16:42:57
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掌控恶魔

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
多抗你还是用Protein A纯化和抗原亲和纯化吧。。硫酸铵沉淀法会抗议有影响
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4楼2017-03-23 13:43:57
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