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烟袋斜街

新虫 (初入文坛)

[求助] SDS-PAGE三层胶电泳样品弥散严重 已有3人参与

最近跑的小分子蛋白电泳,采用三层胶分离,结果不理想。有几个问题想求教,
           1  三层胶中夹层胶的作用。
           2  点样时样品沉降速度慢,有的停留在孔的中间而且还有点往其它孔里漂的现象,求解决办法
           3  Marker停留在夹层胶中有影响吗?
      求大神帮助,谢谢!
SDS-PAGE三层胶电泳样品弥散严重


SDS-PAGE三层胶电泳样品弥散严重-1
IMG_20170320_190602.jpg@hc-material@gyesang
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烟袋斜街

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 十四_14 at 2017-03-22 15:00:39
1、我觉得夹层胶作用有点类似于浓缩胶;有的人使用的方法中也有不配夹层胶的;
2、这是样品本身的问题,但我不知道你的样品是什么,你可以试试loading buffer中甘油含量增大一点,便于样品沉降;
3、marker留在夹 ...

前面样品沉降的问题加了甘油之后解决了,谢谢大神。还想问一下我的marker为什么会被带歪?还有最下面的紫色弥散的地方算是有蛋白吗?

发自小木虫Android客户端
5楼2017-03-25 19:58:26
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查看全部 7 个回答

jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

是不是有粘稠感?
2楼2017-03-22 11:28:41
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十四_14

荣誉版主 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
1、我觉得夹层胶作用有点类似于浓缩胶;有的人使用的方法中也有不配夹层胶的;
2、这是样品本身的问题,但我不知道你的样品是什么,你可以试试loading buffer中甘油含量增大一点,便于样品沉降;
3、marker留在夹层胶中没问题,我的样品中一些比较大的条带也会留在夹层胶里,不影响你要的结果就行
3楼2017-03-22 15:00:39
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xuweitao

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
样品太浓,稀释十倍上样。
4楼2017-03-22 20:33:23
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