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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » 求助各位关于蛋白提取的问题
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zhizunbao834

新虫 (小有名气)

[求助] 求助各位关于蛋白提取的问题 已有1人参与

求助大家关于蛋白提取的问题，我养的是半悬浮的Hel细胞系，细胞比较小，用Ripa裂解细胞，每次裂解的时候，1个million用200左右的裂解液，但是裂解完离心完毕以后ep管子的底部有很多白色沉淀，不知道是没裂解完全的细胞还是细胞碎片，求助各位，如果蛋白裂解液不足，裂解不充分，会影响某些蛋白比如核蛋白的提取吗？我测了蛋白的浓度，还是非常高的。

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1楼 2017-03-19 01:41:34
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小毛虫丽丽

新虫 (初入文坛)
我有楼主同样的困惑
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2楼2017-06-02 10:42:35
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liuxinyueer

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

RIPA裂解效果很强，冰上15min足以，在管底的是细胞碎片，核蛋白有专门的protocol来提取，会用到两种不同渗透压的buffer
赞一下 回复此楼
欢迎讨论，小木虫未能及时回复，请邮箱: lmzhang1994@gmail.com
3楼2017-06-02 22:42:33
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