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zhizunbao834

新虫 (小有名气)

[求助] 求助各位关于蛋白提取的问题 已有1人参与

求助大家关于蛋白提取的问题,我养的是半悬浮的Hel细胞系,细胞比较小,用Ripa裂解细胞,每次裂解的时候,1个million用200左右的裂解液,但是裂解完离心完毕以后ep管子的底部有很多白色沉淀,不知道是没裂解完全的细胞还是细胞碎片,求助各位,如果蛋白裂解液不足,裂解不充分,会影响某些蛋白比如核蛋白的提取吗?我测了蛋白的浓度,还是非常高的。

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小毛虫丽丽

新虫 (初入文坛)

我有楼主同样的困惑
2楼2017-06-02 10:42:35
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liuxinyueer

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

RIPA裂解效果很强,冰上15min足以,在管底的是细胞碎片,核蛋白有专门的protocol来提取,会用到两种不同渗透压的buffer
欢迎讨论,小木虫未能及时回复,请邮箱: lmzhang1994@gmail.com
3楼2017-06-02 22:42:33
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