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wyong186

木虫 (正式写手)

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[交流] 紧急求救：PCR-电泳

真心请教各位分子生物技术高手两个问题：（1）PCR产物进行电泳检测时，30min后为什么还总在加样孔中不动呢？（2)PCR阴性对照出现涂抹带，所有的试剂，枪头都重新换过了，怎么还是这样呢？

前几次做的都挺好，分子实验怎么也这么多变啊？

谢谢各位虫子的帮助，我已经找到真正的原因了，谢谢各位！

[ Last edited by wyong186 on 2009-1-5 at 12:16 ]

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1楼 2008-12-26 17:40:50

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月月大可

木虫 (著名写手)

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★
wyong186(金币+1):谢谢参与

我同意7楼看法，有可能根本就没P出来，留在点样空中的东西可能是蛋白等一类东西，这些东西也会被EB染色后显色。
阴性对照出现要注意操作的细节，是否在操作过程中手碰到PCR管的盖子或管口。按要求来说PCR反映体系应该是在超净工作台里配制的，但是我经常见到有人不在超净台内配制，这样的话如果你们实验室长期做某种菌的试验空气中的含量就有可能污染。气溶胶的问题在做 Real Time 的时候一定要考虑在内。解决办法就是换一个环境做。