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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白电泳/WB » 蛋白质聚丙烯酰胺电泳图分离不好
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蓝蓝的稻田

新虫 (初入文坛)

[求助] 蛋白质聚丙烯酰胺电泳图分离不好 已有2人参与

请问下为什么我的电泳图分离效果不好，但是之前做的都挺好的，胶的浓度都比较合适，是哪里出现问题了呢？红框里面是marker条带，好像分不开，旁边的样品也一样分不好。这煮沸10分钟后在室温下放两个小时有关吗？

蛋白质聚丙烯酰胺电泳图分离不好


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1楼 2017-03-17 09:57:52
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十四_14

荣誉版主 (正式写手)
感觉就是胶没配好
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2楼2017-03-17 11:50:31
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wanshenghao

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你可以采购预制胶跑一次， 这样就可以确实是否是你配胶有问题了。
另外， 不同体系的凝胶各有特点。 如果你一直用的是tris体系， 你可以换一个其他凝胶体系试试看。

我们实验室用的是万生昊天的EZBiolab预制胶， 它是Hepes体系， 正好可以和tris体系印证一下。
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蓝蓝的稻田 蓝蓝的稻田
3楼2017-03-17 14:59:19
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蓝蓝的稻田

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by wanshenghao at 2017-03-17 14:59:19
你可以采购预制胶跑一次， 这样就可以确实是否是你配胶有问题了。
另外， 不同体系的凝胶各有特点。 如果你一直用的是tris体系， 你可以换一个其他凝胶体系试试看。

我们实验室用的是万生昊天的EZBiolab预制胶 ...

之前配的胶跑的挺好的，不知这个是哪个步骤出错了。有人说跟电压有关，那我蛋白质跟dna共用一个电压会不会造成这样的影响呢？

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4楼2017-03-17 18:57:55
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蓝蓝的稻田

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 十四_14 at 2017-03-17 11:50:31
感觉就是胶没配好

我之前配的胶跑得很好。可能这次哪个地方出错了。那配胶要注意什么呢？

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5楼2017-03-17 19:00:03
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蓝蓝的稻田

新虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by wanshenghao at 2017-03-17 14:59:19
你可以采购预制胶跑一次， 这样就可以确实是否是你配胶有问题了。
另外， 不同体系的凝胶各有特点。 如果你一直用的是tris体系， 你可以换一个其他凝胶体系试试看。

我们实验室用的是万生昊天的EZBiolab预制胶 ...

谢谢

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6楼2017-03-19 11:10:40
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蓝蓝的稻田

新虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by wanshenghao at 2017-03-17 14:59:19
你可以采购预制胶跑一次， 这样就可以确实是否是你配胶有问题了。
另外， 不同体系的凝胶各有特点。 如果你一直用的是tris体系， 你可以换一个其他凝胶体系试试看。

我们实验室用的是万生昊天的EZBiolab预制胶 ...

谢谢

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7楼2017-03-19 11:11:12
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芜意橙

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
感觉是分离胶缓冲液的问题，重新配一下试试
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过去的不能改变，未来的你不知道
8楼2017-03-19 12:56:40
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蓝蓝的稻田

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 芜意橙 at 2017-03-19 12:56:40
感觉是分离胶缓冲液的问题，重新配一下试试

好的谢谢！我也觉得是，可能是我的缓冲液没加SDS导致的。

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9楼2017-03-19 14:08:50
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承让了我的弟

新虫 (初入文坛)
楼主能不能把你配胶的配方给我发一下，我最近也在学习蛋白质电泳，不太会配，网上找到资料配出来的胶凝不住

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10楼2017-05-11 16:21:23
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