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三对引物同时使用，正向引物之间以及反向引物之间有重叠（不是巢式PCR）,目的何在？
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三对引物同时使用，正向引物之间以及反向引物之间有重叠（不是巢式PCR）,目的何在？ 针对一个病毒的靶基因的比较保守的区域，有人针对该区域设计引物进行实时PCR以检测该病毒，但是他同时使用了三对引物，并且正向引物之间以及反向引物之间均有几个碱基重叠（不是巢式PCR）,目的何在？ 对于上述做法，我的个人考虑是这样的，请大家帮忙指正：考虑到虽然是针对保守区域扩增，但是难免还是会有个别碱基突变，所以作者设计三对略有重叠的引物进行扩增，以增大包含该病毒的样品的阳性检出率？这样做以增大阳性样本的检出率理论上可行吗？如果理论上可行的话，不知道这种做法是否普遍？谢谢大家。 |
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2楼2017-03-15 16:47:10
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是重叠延伸PCR，最终的结果是三对引物克隆序列以重复区为了解点全连在一起，成为一条长连，实际就是一次把三个不同位置的目的片段克隆出来，一般这三个应该是共同完成一个任务的，但是序列不在一起 发自小木虫Android客户端 |
3楼2017-03-16 06:08:37