应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 高效液相色谱 表征 蛋白质分子量
101/1返回列表
查看: 2776  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

强迫学习

新虫 (初入文坛)

[求助] 高效液相色谱 表征 蛋白质分子量 已有2人参与

想用高效液相色谱表征蛋白质分子交联前后分子量的变化。
    蛋白质的分子量在2.5-10万之间，资料上建议用C4的柱子。
    不知道流动相和PH值怎么选择。
    第一次用HPLC，急求大神们的帮助！！！！！！！！！！！！！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2017-03-09 15:47:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaoLifeiD

至尊木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
分子量应该是用GPC表征的吧，文献题目有么

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
提供GPC服务
2楼2017-03-09 23:22:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

强迫学习

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by xiaoLifeiD at 2017-03-09 23:22:03
分子量应该是用GPC表征的吧，文献题目有么

实验室的GPC是用的氯仿，小麦醇溶蛋白不能溶解到氯仿里面。

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
3楼2017-03-09 23:38:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaoLifeiD

至尊木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 强迫学习 at 2017-03-09 23:38:44
实验室的GPC是用的氯仿，小麦醇溶蛋白不能溶解到氯仿里面。
...

蛋白应该用PBS流动相。另外，测分子量需要尺寸排阻原理，HPLC的柱子测不了分子量，换根GPC用的柱子吧

发自小木虫IOS客户端
赞一下(1人) 回复此楼
提供GPC服务
4楼2017-03-09 23:43:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huangts123

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
蛋白质一般用SEC-HPLC吧，流动相一般是PB液，具体可以参照文献，pH（看色谱柱的范围和样品的稳定性）
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2017-03-10 11:36:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

强迫学习

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by xiaoLifeiD at 2017-03-09 23:43:32
蛋白应该用PBS流动相。另外，测分子量需要尺寸排阻原理，HPLC的柱子测不了分子量，换根GPC用的柱子吧
...

文献题目：小麦胚乳醇溶蛋白反相高效液相色谱分离方法的建立。
实验室现在有的高效液相色谱仪型号是：美国Waters公司的ALLIANCE E2695。
不知道能否做。

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
6楼2017-03-10 16:51:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaoLifeiD

至尊木虫 (知名作家)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 强迫学习 at 2017-03-10 16:51:14
文献题目：小麦胚乳醇溶蛋白反相高效液相色谱分离方法的建立。
实验室现在有的高效液相色谱仪型号是：美国Waters公司的ALLIANCE E2695。
不知道能否做。
...

这个仪器可以测，但是测得是相对分子量，你需要买一组蛋白质标准品。检测器最好是UV，关键是色谱柱是不是用来分离蛋白那种
赞一下(1人) 回复此楼
提供GPC服务
7楼2017-03-10 17:22:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

强迫学习

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by xiaoLifeiD at 2017-03-10 17:22:13
这个仪器可以测，但是测得是相对分子量，你需要买一组蛋白质标准品。检测器最好是UV，关键是色谱柱是不是用来分离蛋白那种...

我的实验目的是为了证明蛋白质交联成功，只要两组样品分子量有差别就可以了。
按文献中的条件可以做出来吗？
另外一般建议用C4的柱子可以吗？
没做过HPLC，请多多指教。?( 'ω' )?

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
8楼2017-03-10 17:39:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaoLifeiD

至尊木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
8楼: Originally posted by 强迫学习 at 2017-03-10 17:39:30
我的实验目的是为了证明蛋白质交联成功，只要两组样品分子量有差别就可以了。
按文献中的条件可以做出来吗？
另外一般建议用C4的柱子可以吗？
没做过HPLC，请多多指教。?( 'ω' )?
...

只测差别的话不用标样了，但是你为什么不直接测DLS？交联前后尺寸肯定有变化。C4柱子我没用过，你可以试试

发自小木虫IOS客户端
赞一下(1人) 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

强迫学习
提供GPC服务
9楼2017-03-10 17:45:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

强迫学习

新虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
9楼: Originally posted by xiaoLifeiD at 2017-03-10 17:45:25
只测差别的话不用标样了，但是你为什么不直接测DLS？交联前后尺寸肯定有变化。C4柱子我没用过，你可以试试
...

第一次做这种测试，不太了解可以用哪些表征。
谢谢你的解答。

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
10楼2017-03-11 11:10:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 强迫学习 的主题更新
101/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[论文投稿] 职称评审，求友友推荐见刊最快的期刊 +4 工厂打螺丝 2026-08-08 4/200 2026-08-12 09:18 by hansi2025
[基金申请] 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分？ +11 yufeiwaner 2026-08-09 13/650 2026-08-12 08:17 by yufeiwaner
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果？ +3 yuleib84 2026-08-11 3/150 2026-08-11 21:53 by jnhyjjm
[基金申请] 有时候，自然基金真的不能太认真 （我的申报经验） +3 majunge000 2026-08-11 4/200 2026-08-11 20:13 by lch2012
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +3 布布和一二 2026-08-11 4/200 2026-08-11 15:20 by aasahr
[基金申请] 我的国基提前知道中了，可是同事的操作让我实在接受不了，怎么会有这样的人 +8 家与远方 2026-08-10 13/650 2026-08-11 09:49 by 家与远方
[基金申请] 确定了，国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 关于代码变化问题，想知道的进来 +17 且听虎啸 2026-08-07 24/1200 2026-08-10 18:35 by zhangduo2008
[基金申请] 静等基金结果 +5 gjjjzhong 2026-08-10 16/800 2026-08-10 17:19 by Tide man
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
[基金申请] 这样的filecode谁见过 +11 布布和一二 2026-08-08 22/1100 2026-08-10 11:10 by wmfsnow
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +5 西山十月 2026-08-09 7/350 2026-08-10 07:32 by 仁砚薪传
[基金申请] fileCode有新解读？ +10 Tide man 2026-08-08 18/900 2026-08-09 12:55 by 仁砚薪传
[基金申请] 关于filecode，很负责任的告诉大家 +6 爱看书的可乐 2026-08-08 7/350 2026-08-08 22:13 by a_niu
[基金申请] 关于豆爷回答的JTJC与%2F数量 +5 yang182083 2026-08-06 7/350 2026-08-08 18:29 by zhanghaozhu
[基金申请] 关于filecode +4 布布和一二 2026-08-07 7/350 2026-08-07 22:55 by zhanghaozhu
[基金申请] 大家散了吧，后缀研究没有意义，别浪费时间了，过好目前的每一天，不要焦虑 +5 Tide man 2026-08-06 7/350 2026-08-07 13:11 by 医学老男孩
[基金申请] filecode +8 布布和一二 2026-08-06 11/550 2026-08-06 20:41 by tangpu318
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭