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309486980

新虫 (初入文坛)

[交流] 蛋白表达加his tag 后失活求原因

求大神们帮帮忙,我在做原核表达,用的是pe t22b质粒,在质粒上插入一段完整的序列,插入位置是ncol1和xhol1之间,序列后面有终止子taa,后面紧跟着载体上的his tag 标签,蛋白表达有酶活,我把终止子去掉之后,同样的条件做蛋白表达,但是没有酶活了,这是为什么。求原因。
同样的序列加上his tag标签后在酵母中表达是有酶活的。
新人,没金币,请大神么不吝赐教。谢谢
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309486980

新虫 (初入文坛)

我自己顶一下。没有人吗?

发自小木虫IOS客户端
2楼2017-03-17 08:54:39
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biosci

捐助贵宾 (知名作家)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我碰到过加了his,可溶蛋白变包含体的

发自小木虫Android客户端
3楼2017-03-17 13:46:25
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siyuyouai

银虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
蛋白表达就是个神奇的活,好多东西根本解释不了,换3、5体系能得到可溶有活性的蛋白那都是幸运的
4楼2017-03-17 14:45:12
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