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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 关于HPLC谱图
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木梁丁丁

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于HPLC谱图 已有4人参与

谢谢您留意本贴!本人科研菜鸟，刚接触色谱。碰到一个问题，希望各位同道能不吝赐教。我在梯度洗脱分离物质的时候，发现在初期10秒左右总会有一个一下一上的谱图波动，期间压力从2500psi降到1000.又快速回升到2500（总过程不到30秒）。之前也平衡了色谱柱，基线很稳，走单标也出现同样问题，可是单标和样品正常无污染（在别的型号柱子上检测过）。实在很困惑...希望有知道的朋友能帮帮我

@wyy080214 发自小木虫Android客户端
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1楼 2017-03-07 17:07:43
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wyy080214

实习版主 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
一、使用梯度，压力变化正常，基线漂移正常。
二、压力随机的波动，平衡后依旧波动，样品分析中重现性很差，在排除其它连接点错误的情况下，则考虑密封垫漏液。需要更换密封垫。
三、如上图，如果样品重现性比较好，一般系统无碍。死体积附近的压力波动正常，一是溶剂混合导致的溶剂峰，二是因为阀切换所导致的。
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» 本帖已获得的红花（最新10朵）

木梁丁丁
6楼2017-03-07 22:20:12
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llw1986

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你那个是不是没针都有个类似的峰在同一个出峰位置处，那个色谱图应该是溶剂峰
压力变化是因为你流动相组分开始发生变化了，压力变化是正常的对于梯度洗脱来说，有机相升高压力开始变小，慢慢有机相变低后压力又升回来了，这是正常的
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2楼2017-03-07 17:14:07
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木梁丁丁

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by llw1986 at 2017-03-07 17:14:07
你那个是不是没针都有个类似的峰在同一个出峰位置处，那个色谱图应该是溶剂峰
压力变化是因为你流动相组分开始发生变化了，压力变化是正常的对于梯度洗脱来说，有机相升高压力开始变小，慢慢有机相变低后压力又升回 ...

您好，我有点困惑，就是我整个梯度前段和末端梯度流动相组成都是一样的，也都平衡了2个柱体积，为什么还会有波动呢？我把图附在下面，依次是空白，单标，单标压力。谢谢您！
关于HPLC谱图


关于HPLC谱图-1


关于HPLC谱图-2



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3楼2017-03-07 18:15:05
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求道于申

铜虫 (小有名气)
前排期待大神解答
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4楼2017-03-07 20:32:44
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