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木梁丁丁

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于HPLC谱图 已有4人参与

谢谢您留意本贴!本人科研菜鸟,刚接触色谱。碰到一个问题,希望各位同道能不吝赐教。我在梯度洗脱分离物质的时候,发现在初期10秒左右总会有一个一下一上的谱图波动,期间压力从2500psi降到1000.又快速回升到2500(总过程不到30秒)。之前也平衡了色谱柱,基线很稳,走单标也出现同样问题,可是单标和样品正常无污染(在别的型号柱子上检测过)。实在很困惑...希望有知道的朋友能帮帮我

@wyy080214 发自小木虫Android客户端
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木梁丁丁

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by llw1986 at 2017-03-07 17:14:07
你那个是不是没针都有个类似的峰在同一个出峰位置处,那个色谱图应该是溶剂峰
压力变化是因为你流动相组分开始发生变化了,压力变化是正常的对于梯度洗脱来说,有机相升高压力开始变小,慢慢有机相变低后压力又升回 ...

您好,我有点困惑,就是我整个梯度前段和末端梯度流动相组成都是一样的,也都平衡了2个柱体积,为什么还会有波动呢?我把图附在下面,依次是空白,单标,单标压力。谢谢您!
关于HPLC谱图


关于HPLC谱图-1


关于HPLC谱图-2



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3楼2017-03-07 18:15:05
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llw1986

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你那个是不是没针都有个类似的峰在同一个出峰位置处,那个色谱图应该是溶剂峰
压力变化是因为你流动相组分开始发生变化了,压力变化是正常的对于梯度洗脱来说,有机相升高压力开始变小,慢慢有机相变低后压力又升回来了,这是正常的
2楼2017-03-07 17:14:07
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求道于申

铜虫 (小有名气)

前排期待大神解答
4楼2017-03-07 20:32:44
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chjm1016

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
一负一正是溶剂峰,正常现象。压力变化看起来是进样一瞬间压力开始下降,然后慢慢恢复,你的进样量是多少?溶剂是什么?感觉是你打进大量的有机溶剂,使色谱柱中的流动相被样品溶剂代替了,所以压力下降,后来流动相再慢慢进入色谱柱,因此压力慢慢上升到正常水平。
5楼2017-03-07 22:15:33
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