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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 设计了多对引物，但是却始终扩增不出来
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lwk5716

铁杆木虫 (正式写手)

[求助] 设计了多对引物，但是却始终扩增不出来

大家好，我设计了多对引物想扩增一个玉米的基因，片段不长，不到2Kb，但是设计了几对，始终扩增不出，并且有时扩增的杂带特别亮，引物是根据参考序列设计的。师兄说，以前用好的酶扩增过，可以的。但是，现在想鉴定这个材料的转基因植株，用量大，想用普通酶扩，结果就不行了，我想问这是什么原因啊？引物是根据模板设计的啊。
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1楼 2017-03-05 19:24:32
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九生123

新虫 (小有名气)
建议楼主做一个不同退火温度的pcr，摸索一下最佳退火温度。感觉退火影响蛮大的

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2楼2017-03-06 08:40:21
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lwk5716

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 九生123 at 2017-03-06 08:40:21
建议楼主做一个不同退火温度的pcr，摸索一下最佳退火温度。感觉退火影响蛮大的

好的，我再看一下退火温度吧，以前试过，没见好的效果。

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3楼2017-03-06 12:54:43
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