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lwk5716

铁杆木虫 (正式写手)

[求助] 设计了多对引物,但是却始终扩增不出来

大家好,我设计了多对引物想扩增一个玉米的基因,片段不长,不到2Kb,但是设计了几对,始终扩增不出,并且有时扩增的杂带特别亮,引物是根据参考序列设计的。师兄说,以前用好的酶扩增过,可以的。但是,现在想鉴定这个材料的转基因植株,用量大,想用普通酶扩,结果就不行了,我想问这是什么原因啊?引物是根据模板设计的啊。
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九生123

新虫 (小有名气)

建议楼主做一个不同退火温度的pcr,摸索一下最佳退火温度。感觉退火影响蛮大的

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2楼2017-03-06 08:40:21
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lwk5716

铁杆木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 九生123 at 2017-03-06 08:40:21
建议楼主做一个不同退火温度的pcr,摸索一下最佳退火温度。感觉退火影响蛮大的

好的,我再看一下退火温度吧,以前试过,没见好的效果。

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3楼2017-03-06 12:54:43
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