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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 病原/病毒 » 轮状病毒和胰酶的问题
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girljqc

铜虫 (初入文坛)

[求助] 轮状病毒和胰酶的问题 已有2人参与

在培养轮状病毒的时候需要用胰酶激活处理，为什么不能用有EDTA的胰酶？它对细胞有什么影响吗？
我在用MA104细胞培养BRV，很少有直接写这个的文献。但是看到有些文献培养猪的轮状病毒的，有的用胰酶处理，有的却不用。还有用病毒处理细胞，在维持液里也要加胰酶吗？

还有胰酶的量具体要加多少呢？看见有的文章里写什么3μg/ml，那具体要加几毫升胰酶呢？是按计算最后体系内胰酶的量达到3μg/ml吗？

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1楼 2017-03-01 15:57:09
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Alisa102010

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我和你遇到了同样的问题，我是接人源性RV，一直接不上毒，做这个都快一年了，都找不到问题所在，你解决没？能否经验分享下
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2楼2017-04-18 09:55:33
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632494587ZYj

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

轮状病毒的VP4蛋白可以被胰酶酶切成VP5和VP8，可以提高病毒的感染性。因为VP7蛋白为钙离子依赖型蛋白，如果加含EDTA的胰酶会使病毒脱壳，然后失去感染性，所以不能加含有EDTA的胰酶。 胰酶处理病毒时胰酶浓度一般为10ug/ml, 维持液浓度一般为2ug/ml
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3楼2017-05-22 19:07:38
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