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girljqc

铜虫 (初入文坛)


[求助] 轮状病毒和胰酶的问题 已有2人参与

在培养轮状病毒的时候需要用胰酶激活处理,为什么不能用有EDTA的胰酶?它对细胞有什么影响吗?
我在用MA104细胞培养BRV,很少有直接写这个的文献。但是看到有些文献培养猪的轮状病毒的,有的用胰酶处理,有的却不用。还有用病毒处理细胞,在维持液里也要加胰酶吗?

还有胰酶的量具体要加多少呢?看见有的文章里写什么3μg/ml,那具体要加几毫升胰酶呢?是按计算最后体系内胰酶的量达到3μg/ml吗?

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Alisa102010

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我和你遇到了同样的问题,我是接人源性RV,一直接不上毒,做这个都快一年了,都找不到问题所在,你解决没?能否经验分享下
2楼2017-04-18 09:55:33
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632494587ZYj

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

轮状病毒的VP4蛋白可以被胰酶酶切成VP5和VP8,可以提高病毒的感染性。因为VP7蛋白为钙离子依赖型蛋白,如果加含EDTA的胰酶会使病毒脱壳,然后失去感染性,所以不能加含有EDTA的胰酶。 胰酶处理病毒时胰酶浓度一般为10ug/ml, 维持液浓度一般为2ug/ml
3楼2017-05-22 19:07:38
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