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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » Hoechst33342染色问题
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leetsin

新虫 (初入文坛)

[交流] Hoechst33342染色问题 已有3人参与

求助：
最近想做一个抑菌材料的抑菌实验，实验步骤大概是将菌液和抑菌材料加一起反应，隔一段时间取样，将菌液用Hoechst33342染色，荧光显微镜下观察，预期结果是随着反应时间的变化，活菌数量减少，荧光显微镜下观察的结果应该是蓝色面积减少。Hoechst33342染色后在显微镜下观察能观察到细菌形态么？我所用的菌是大肠杆菌。实验结果如图，观察到的是一个个点，也不知道是不是细菌，还有一些地方有大片的蓝片，据说是没洗干净，但是我染完色都会用灭菌水洗5~6遍，还是如此，求大神帮我分析分析。要是能提供详细的Hoechst33342染色步骤就更完美了。

Hoechst33342染色问题
0-1.jpg


Hoechst33342染色问题-1
1-1.jpg


Hoechst33342染色问题-2
4-6.jpg
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1楼 2017-03-01 10:47:52
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leetsin

新虫 (初入文坛)
荧光显微镜观察放大倍数是10*
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2楼2017-03-01 10:49:53
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草溪河

铁虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
很可能是玻片上的杂质自发荧光。10倍能看清细菌吗？

发自小木虫Android客户端
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3楼2017-03-01 11:01:35
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leetsin

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 草溪河 at 2017-03-01 11:01:35
很可能是玻片上的杂质自发荧光。10倍能看清细菌吗？

应该不是杂质，因为用的玻片都是新的，实验也是做了好几次，都是类似这样的结果。请问您之前做过这方面的研究么？能给一些染色步骤么？
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4楼2017-03-01 12:15:37
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Yshx_w

铁虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
染色需要恰到好处，看好多文章里是这么写的，我想用这个观察纤维，请问楼主是在哪做的，我们这边缺设备，能否帮忙联系一下，给点信息
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5楼2017-03-01 21:06:42
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leetsin

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by Yshx_w at 2017-03-01 21:06:42
染色需要恰到好处，看好多文章里是这么写的，我想用这个观察纤维，请问楼主是在哪做的，我们这边缺设备，能否帮忙联系一下，给点信息

我是在学校的实验室做的，学校有荧光显微镜。恰到好处？这个很难拿捏啊！
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6楼2017-03-01 21:42:40
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1336867573

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
楼主用的什么光激发的？？？？？

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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7楼2018-05-18 00:35:34
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